1 • Chromatographie, aspects généraux
35
N ◦ pic
t R
Composé
Aire (unités arbitraires)
1
2,54
méthyl ester (ME)
2340,1
2
3,47
éthyl ester (EE)
2359,0
3
5,57
propyl ester (PE)
4077,3
4
7,34
butyl ester (BE)
4320,7
Exercice 1.9
Dosage de la sérotonine S (5-hydroxytryptamine) par la méthode de l’étalon interne.
On prélève 1 mL de la solution à doser à laquelle on ajoute 1 mL d’une solution contenant
30 ng de N -méthylsérotonine (NMS). On traite ce mélange pour le débarrasser d’autres
composés gênants. On opère par extraction en phase solide pour isoler la sérotonine et son
dérivé méthylé, dilués dans une phase convenable.
a) Pourquoi ajoute-t-on le composé d’étalonnage interne avant l’étape d’extraction ?
b) Calculer le facteur de réponse de la sérotonine par rapport à la N -méthylsérotonine sachant que le chromatogramme d’étalonnage conduit aux résultats suivants :
– aire sérétonine
30 885 982 mV·s
quantité injectée : 5 ng
– aire N -méthylsérétonine
30 956 727 mV·s
quantité injectée : 5 ng
À partir du chromatogramme de la solution échantillon, trouver quelle est la concentration en sérotonine dans l’échantillon de départ sachant que l’aire du pic sérétonine vaut
2 573 832 mV·s et l’aire du pic N -méthylsérétonine 1 719 818 mV·s.