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Partie 1 • Méthodes séparatives
1.17 MÉTHODE PAR NORMALISATION INTERNE
Cette méthode, également appelée « 100 % normalisée », est réservée aux mélanges dont on
a identifié tous les constituants par autant de pics d’élution séparés sur le chromatogramme,
afin de pouvoir faire le bilan complet de l’échantillon concerné.
Supposons qu’il s’agisse de trouver les concentrations massiques d’un mélange de trois
composés 1 ,2, 3 (fig. 1.17). On va procéder ici encore en deux étapes.
chromatogramme d'étalonnage
chromatogramme de la solution à doser
1
1
2
2
3
3
C réf.
C éch.
A réf.
A éch.
A 1
A' 1
C 1
C' 1 ?
A 3
A' 3
C 3
C' 3 ?
A 2
A' 2
C 2
C' 2 ?
pic solvant
pic solvant
0
0
Figure 1.17 Méthode d’analyse par normalisation interne.
1.17.1 Calcul des coefficients de réponse relatifs
On prépare une solution d’étalonnage contenant les trois composés 1, 2, et 3 dont les
concentrations massiques sont respectivement C 1 , C 2 , C 3 . Le chromatogramme correspondant à l’injection d’un volume V , présente trois pics d’aires A 1 , A 2 et A 3 . Ces aires seront
reliées aux masses injectées m 1 , m 2 et m 3 par trois expressions du type 1.35.
On choisit l’un des composés comme substance de normalisation interne, le composé 3
par exemple, afin de déterminer les coefficients de réponse relatifs K 1/3 et K 2/3 des composés 1 et 2 par rapport à 3. On trouve comme précédemment :
K 1/3 =
K 1
K 3
=
m 1 · A 3
m 3 · A 1
et
K 2/3 =
K 2
K 3
=
m 2 · A 3
m 3 · A 2
Étant donné que m i = C i · V , on aboutit, pour K 1/3 et K 2/3 , aux expressions suivantes :
K 1/3 =
C 1 · A 3
C 3 · A 1
et
K 2/3 =
C 2 · A 3
C 3 · A 2
1.17.2 Chromatographie de l’échantillon – Calcul des concentrations
On procède ensuite à l’injection d’un prise d’essai du mélange à doser contenant les constituants 1, 2 et 3. En désignant les surfaces des pics d’élution par A
1 , A
2 et A
3 , on aura accès
directement à la composition centésimale massique du mélange représentée par x 1 , x 2 et x 3
en écrivant trois expressions de la forme :
x i % =
K i/3 · A
i
K 1/3 · A
1 + K 2/3 · A
2 + A
3
× 100 (avec i = 1,2, 3)
la condition de normalisation étant que x 1 + x 2 + x 3 = 100
Partie 1 • Méthodes séparatives
1.17 MÉTHODE PAR NORMALISATION INTERNE
Cette méthode, également appelée « 100 % normalisée », est réservée aux mélanges dont on
a identifié tous les constituants par autant de pics d’élution séparés sur le chromatogramme,
afin de pouvoir faire le bilan complet de l’échantillon concerné.
Supposons qu’il s’agisse de trouver les concentrations massiques d’un mélange de trois
composés 1 ,2, 3 (fig. 1.17). On va procéder ici encore en deux étapes.
chromatogramme d'étalonnage
chromatogramme de la solution à doser
1
1
2
2
3
3
C réf.
C éch.
A réf.
A éch.
A 1
A' 1
C 1
C' 1 ?
A 3
A' 3
C 3
C' 3 ?
A 2
A' 2
C 2
C' 2 ?
pic solvant
pic solvant
0
0
Figure 1.17 Méthode d’analyse par normalisation interne.
1.17.1 Calcul des coefficients de réponse relatifs
On prépare une solution d’étalonnage contenant les trois composés 1, 2, et 3 dont les
concentrations massiques sont respectivement C 1 , C 2 , C 3 . Le chromatogramme correspondant à l’injection d’un volume V , présente trois pics d’aires A 1 , A 2 et A 3 . Ces aires seront
reliées aux masses injectées m 1 , m 2 et m 3 par trois expressions du type 1.35.
On choisit l’un des composés comme substance de normalisation interne, le composé 3
par exemple, afin de déterminer les coefficients de réponse relatifs K 1/3 et K 2/3 des composés 1 et 2 par rapport à 3. On trouve comme précédemment :
K 1/3 =
K 1
K 3
=
m 1 · A 3
m 3 · A 1
et
K 2/3 =
K 2
K 3
=
m 2 · A 3
m 3 · A 2
Étant donné que m i = C i · V , on aboutit, pour K 1/3 et K 2/3 , aux expressions suivantes :
K 1/3 =
C 1 · A 3
C 3 · A 1
et
K 2/3 =
C 2 · A 3
C 3 · A 2
1.17.2 Chromatographie de l’échantillon – Calcul des concentrations
On procède ensuite à l’injection d’un prise d’essai du mélange à doser contenant les constituants 1, 2 et 3. En désignant les surfaces des pics d’élution par A
1 , A
2 et A
3 , on aura accès
directement à la composition centésimale massique du mélange représentée par x 1 , x 2 et x 3
en écrivant trois expressions de la forme :
x i % =
K i/3 · A
i
K 1/3 · A
1 + K 2/3 · A
2 + A
3
× 100 (avec i = 1,2, 3)
la condition de normalisation étant que x 1 + x 2 + x 3 = 100