21 • Traitement des échantillons
415
analyse
(15 % du temps)
résultats et rapports
(25 % du temps)
préparation
de l'échantillon
(60 % du temps)
Figure 21.1 Statistique faisant état de la répartition moyenne du temps passé pour faire
une analyse par chromatographie.
La préparation des échantillons représente généralement une fraction importante du
temps total consacré à l’analyse .
21.2 EXTRACTION EN PHASE SOLIDE (SPE)
L’extraction sur phase solide est utilisée couramment pour purifier ou concentrer un extrait
brut préalablement au dosage d’un ou plusieurs de ses constituants. Ce procédé remplace
avantageusement de plus en plus souvent la méthode d’extraction liquide/liquide que l’on
fait en utilisant une ampoule à décanter, un procédé comparativement moins rapide et plus
coûteux.
À cette fin on utilise une petite cartouche ouverte en matière plastique, ressemblant à un
corps de seringue, contenant un adsorbant solide approprié (par ex. une cartouche de 100 à
300 mg d’une phase type RP18) sur lequel on fait passer un volume connu de l’extrait brut
(fig. 21.2). Il existe deux modes d’utilisation :
– Le mode le plus courant consiste dans un premier temps à retenir sur l’adsorbant les
composés d’intérêt pour l’analyse projetée et à éliminer de la matrice initiale, par rinçage,
le plus possible de constituants jugés indésirables pour la suite du dosage. Dans un second
temps on récupère par élution les analytes avec un faible volume de solvant. On a ainsi
reconstitué une solution fortement enrichie en analytes, une nécessité pour les analyses
de traces.
– L’autre mode, moins fréquent, bien que très simple, consiste à faire passer l’échantillon
sur le remplissage pour retenir les composés non-désirés tandis que les analytes passent
librement. Dans ce cas ils sont purifiés mais non concentrés.
La nature des adsorbants est proche de celle des phases solides de la chromatographie liquide. On trouve des gels de silice greffés (polarité de phase inversée), avec une
granulométrie de 40 à 100 mm pour permettre une percolation d’un débit plus rapide.
D’autres adsorbants à base de carbone graphité ou de copolymères styrène-divinylbenzène
à grande surface spécifique, porteurs de groupements fonctionnels, sont plus stables pour
les solutions à pH très acides. On trouve également des disques d’extraction (0,5 mm
d’épaisseur et 25 à 90 mm de diamètre) utilisés comme l’est un papier filtre sur une
fiole à vide, destinés à retenir les traces de composés organiques présents dans des
volumes importants de solutions aqueuses, ce qui n’est guère possible avec les cartouches décrites ci-dessus. Il y a dans ce cas une concentration (le facteur d’enrichissement peut atteindre 100, ce qui facilite l’analyse en augmentant les limites de détection).
© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit
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analyse
(15 % du temps)
résultats et rapports
(25 % du temps)
préparation
de l'échantillon
(60 % du temps)
Figure 21.1 Statistique faisant état de la répartition moyenne du temps passé pour faire
une analyse par chromatographie.
La préparation des échantillons représente généralement une fraction importante du
temps total consacré à l’analyse .
21.2 EXTRACTION EN PHASE SOLIDE (SPE)
L’extraction sur phase solide est utilisée couramment pour purifier ou concentrer un extrait
brut préalablement au dosage d’un ou plusieurs de ses constituants. Ce procédé remplace
avantageusement de plus en plus souvent la méthode d’extraction liquide/liquide que l’on
fait en utilisant une ampoule à décanter, un procédé comparativement moins rapide et plus
coûteux.
À cette fin on utilise une petite cartouche ouverte en matière plastique, ressemblant à un
corps de seringue, contenant un adsorbant solide approprié (par ex. une cartouche de 100 à
300 mg d’une phase type RP18) sur lequel on fait passer un volume connu de l’extrait brut
(fig. 21.2). Il existe deux modes d’utilisation :
– Le mode le plus courant consiste dans un premier temps à retenir sur l’adsorbant les
composés d’intérêt pour l’analyse projetée et à éliminer de la matrice initiale, par rinçage,
le plus possible de constituants jugés indésirables pour la suite du dosage. Dans un second
temps on récupère par élution les analytes avec un faible volume de solvant. On a ainsi
reconstitué une solution fortement enrichie en analytes, une nécessité pour les analyses
de traces.
– L’autre mode, moins fréquent, bien que très simple, consiste à faire passer l’échantillon
sur le remplissage pour retenir les composés non-désirés tandis que les analytes passent
librement. Dans ce cas ils sont purifiés mais non concentrés.
La nature des adsorbants est proche de celle des phases solides de la chromatographie liquide. On trouve des gels de silice greffés (polarité de phase inversée), avec une
granulométrie de 40 à 100 mm pour permettre une percolation d’un débit plus rapide.
D’autres adsorbants à base de carbone graphité ou de copolymères styrène-divinylbenzène
à grande surface spécifique, porteurs de groupements fonctionnels, sont plus stables pour
les solutions à pH très acides. On trouve également des disques d’extraction (0,5 mm
d’épaisseur et 25 à 90 mm de diamètre) utilisés comme l’est un papier filtre sur une
fiole à vide, destinés à retenir les traces de composés organiques présents dans des
volumes importants de solutions aqueuses, ce qui n’est guère possible avec les cartouches décrites ci-dessus. Il y a dans ce cas une concentration (le facteur d’enrichissement peut atteindre 100, ce qui facilite l’analyse en augmentant les limites de détection).
© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit