Chapitre 1
Chromatographie,
aspects généraux
La chromatographie est une méthode de séparation des constituants présents dans des
mélanges variés. Elle sert en analyse pour identifier et quantifier des composés au sein
d’échantillons divers. Le principe de base repose sur les équilibres de concentration
qui apparaissent lorsqu’un composé est mis en présence de deux phases non miscibles.
En chromatographie, l’une, dite stationnaire, est emprisonnée dans une colonne ou fixée sur
un support et l’autre, dite mobile, se déplace au contact de la première. Si plusieurs composés sont présents, ils se trouvent entraînés à des vitesses différentes, provoquant leur séparation. Ce procédé hydrodynamique a donné naissance à une méthode analytique instrumentale qui a un très grand domaine d’applicabilité et par suite se trouve très répandue. Aucun
laboratoire analysant des composés moléculaires ne peut ignorer la chromatographie.
1.1 GÉNÉRALITÉS SUR LA CHROMATOGRAPHIE ANALYTIQUE
La chromatographie est un procédé physico-chimique de séparation, au même titre que la
distillation, la cristallisation ou l’extraction fractionnée, des constituants d’un mélange homogène liquide ou gazeux. Les applications de ce procédé sont donc potentiellement très
nombreuses, d’autant plus que beaucoup de mélanges hétérogènes ou sous forme solide
peuvent être mis en solution par emploi d’un solvant (celui-ci apparaissant comme un composé supplémentaire).
L’expérience de base en chromatographie peut être décrite comme suit (fig. 1.1) :
1. On immobilise dans une colonne un solide finement divisé appelé phase stationnaire.
2. On place au sommet de cette colonne un petit volume de l’échantillon à séparer.
3. On force cet échantillon à traverser la colonne de haut en bas au moyen de la phase
mobile afin d’entraîner ses divers constituants. Si les composés présents migrent à des
vitesses différentes, ils pourront être recueillis séparément, chacun en solution dans la
phase mobile.
En dehors de cette exploitation de la chromatographie qui perdure depuis son origine, ce
procédé est devenu en soi une méthode d’analyse lorsqu’on eut l’idée de mesurer les temps
de migration des composés dans la colonne pour les identifier. Pour cela il devenait indispensable de maîtriser certains paramètres (débits, température...) et il fallait placer en sortie
de colonne un détecteur pour repérer les changements de composition de la phase mobile.
Chromatographie,
aspects généraux
La chromatographie est une méthode de séparation des constituants présents dans des
mélanges variés. Elle sert en analyse pour identifier et quantifier des composés au sein
d’échantillons divers. Le principe de base repose sur les équilibres de concentration
qui apparaissent lorsqu’un composé est mis en présence de deux phases non miscibles.
En chromatographie, l’une, dite stationnaire, est emprisonnée dans une colonne ou fixée sur
un support et l’autre, dite mobile, se déplace au contact de la première. Si plusieurs composés sont présents, ils se trouvent entraînés à des vitesses différentes, provoquant leur séparation. Ce procédé hydrodynamique a donné naissance à une méthode analytique instrumentale qui a un très grand domaine d’applicabilité et par suite se trouve très répandue. Aucun
laboratoire analysant des composés moléculaires ne peut ignorer la chromatographie.
1.1 GÉNÉRALITÉS SUR LA CHROMATOGRAPHIE ANALYTIQUE
La chromatographie est un procédé physico-chimique de séparation, au même titre que la
distillation, la cristallisation ou l’extraction fractionnée, des constituants d’un mélange homogène liquide ou gazeux. Les applications de ce procédé sont donc potentiellement très
nombreuses, d’autant plus que beaucoup de mélanges hétérogènes ou sous forme solide
peuvent être mis en solution par emploi d’un solvant (celui-ci apparaissant comme un composé supplémentaire).
L’expérience de base en chromatographie peut être décrite comme suit (fig. 1.1) :
1. On immobilise dans une colonne un solide finement divisé appelé phase stationnaire.
2. On place au sommet de cette colonne un petit volume de l’échantillon à séparer.
3. On force cet échantillon à traverser la colonne de haut en bas au moyen de la phase
mobile afin d’entraîner ses divers constituants. Si les composés présents migrent à des
vitesses différentes, ils pourront être recueillis séparément, chacun en solution dans la
phase mobile.
En dehors de cette exploitation de la chromatographie qui perdure depuis son origine, ce
procédé est devenu en soi une méthode d’analyse lorsqu’on eut l’idée de mesurer les temps
de migration des composés dans la colonne pour les identifier. Pour cela il devenait indispensable de maîtriser certains paramètres (débits, température...) et il fallait placer en sortie
de colonne un détecteur pour repérer les changements de composition de la phase mobile.