11 • Fluorimétrie et chimiluminescence
215
500
600
700
800
900
longueurs d'onde (nm)
intensité fluo.
λ d 'e x c it a ti o n
440 480
320
400
360
200 240
320
360
400
280
285 nm
240 nm
347 nm
280
0
20
40
60
80
100
0
20
40
60
80
100
nm
nm
intensité rel.
intensité rel.
spectre d'émission
spectre d'excitation
B
A
bis chlorhydrate d'o-diaminobenzène C = 10 ppm dans l'eau
NH 2
NH 2
2HCl
Figure 11.10 Spectres de fluorescence.
En haut : Matrice d’émission-excitation d’un mélange de deux ions fluorescents. Représentation topographique en 3D de la fluorescence totale d’un mélange de deux sels
d’uranium et de terbium en faisant varier la longueur d’onde excitatrice. Un tel enregistrement permettrait de trouver les conditions optimales de dosage de ce mélange. En
bas : Spectres d’émission-excitation. A : Spectre d’émission de fluorescence obtenu en
maintenant la longueur d’onde d’excitation à 285 nm. B : Spectre d’excitation obtenu
en maintenant le monochromateur d’émission à 347 nm pendant la durée de l’enregistrement.
11.6 QUELQUES APPLICATIONS DE LA FLUORESCENCE
En dehors des molécules possédant une fluorescence naturelle (moins de 10 % de l’ensemble des composés), beaucoup peuvent le devenir par le biais d’une modification ou d’une
association avec une autre molécule fluorescente. On peut greffer par exemple sur l’analyte
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