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Partie 2 • Méthodes spectrométriques
absorbance
1 - élution d'un composé pur
2 - élution d'un mélange de composés
X Y
Y
a
b
temps
1
2
abs (mUA)
λ
λ (nm)
λ + 10
A λ
A λ+10
A λ A λ+10
/
Figure 9.24 Analyse de confirmation.
a) Spectre d’un mélange (X + Y) et spectre de Y seul dans le même domaine (partie
grisée) ; b) dessin illustrant un chromatogramme qui présente deux pics dont le premier
est dû à un composé unique et le second à l’élution de deux composés légèrement décalés dans le temps. L’évolution du rapport des absorbances en cours d’élution permet
de contrôler la pureté des composés élués. Ces variations sont habituellement mises en
évidence par les logiciels sous forme de plages colorées.
9.12 ANALYSE MULTICOMPOSANTS (MCA)
Lorsqu’on est en présence d’un mélange de composés dont les spectres d’absorption individuels sont connus, on peut en déterminer la composition. Selon la loi d’additivité (relation
9.11), le spectre du mélange correspond à la somme pondérée des spectres de chacun des
constituants. La méthode classique de calcul est rappelée ici pour mémoire. Elle n’est plus
utilisée telle quelle, mais au travers des outils logiciels.
9.12.1 Méthode algébrique de base
Soit un mélange de trois composés a, b, c en solution (conc. c a , c b , c c ). On mesure les
absorbances de cette solution à trois longueurs d’onde l 1 , l 2 et l 3 , soit A 1 , A 2 et A 3 .
Connaissant les valeurs des absorbances spécifiques de chacun des trois composés pris isolément pour ces trois longueurs d’onde (9 valeurs au total, de ´
1
a à ´
3
c ) on écrira, par application de la loi d’additivité des absorbances, le système suivant de trois équations (on suppose
que le trajet optique des cuves utilisées est de 1 cm) :
à l 1
A 1 = ´
1
a c a + ´
1
b c b + ´
1
c c c
à l 2
A 2 = ´
2
a c a + ´
2
b c b + ´
2
c c c
à l 3
A 3 = ´
3
a c a + ´
3
b c b + ´
3
c c c
La résolution de ce système, qui correspond à une matrice [3 × 3], permet de trouver les
trois concentrations cherchées c a , c b et c c .
c 1
c 2
c 3
=
A 1
A 2
A 3
·
´
1
a ´
1
b ´
1
c
´
2
a ´
2
b ´
2
c
´
3
a ´
3
b ´
3
c
−1
(9.14)
Partie 2 • Méthodes spectrométriques
absorbance
1 - élution d'un composé pur
2 - élution d'un mélange de composés
X Y
Y
a
b
temps
1
2
abs (mUA)
λ
λ (nm)
λ + 10
A λ
A λ+10
A λ A λ+10
/
Figure 9.24 Analyse de confirmation.
a) Spectre d’un mélange (X + Y) et spectre de Y seul dans le même domaine (partie
grisée) ; b) dessin illustrant un chromatogramme qui présente deux pics dont le premier
est dû à un composé unique et le second à l’élution de deux composés légèrement décalés dans le temps. L’évolution du rapport des absorbances en cours d’élution permet
de contrôler la pureté des composés élués. Ces variations sont habituellement mises en
évidence par les logiciels sous forme de plages colorées.
9.12 ANALYSE MULTICOMPOSANTS (MCA)
Lorsqu’on est en présence d’un mélange de composés dont les spectres d’absorption individuels sont connus, on peut en déterminer la composition. Selon la loi d’additivité (relation
9.11), le spectre du mélange correspond à la somme pondérée des spectres de chacun des
constituants. La méthode classique de calcul est rappelée ici pour mémoire. Elle n’est plus
utilisée telle quelle, mais au travers des outils logiciels.
9.12.1 Méthode algébrique de base
Soit un mélange de trois composés a, b, c en solution (conc. c a , c b , c c ). On mesure les
absorbances de cette solution à trois longueurs d’onde l 1 , l 2 et l 3 , soit A 1 , A 2 et A 3 .
Connaissant les valeurs des absorbances spécifiques de chacun des trois composés pris isolément pour ces trois longueurs d’onde (9 valeurs au total, de ´
1
a à ´
3
c ) on écrira, par application de la loi d’additivité des absorbances, le système suivant de trois équations (on suppose
que le trajet optique des cuves utilisées est de 1 cm) :
à l 1
A 1 = ´
1
a c a + ´
1
b c b + ´
1
c c c
à l 2
A 2 = ´
2
a c a + ´
2
b c b + ´
2
c c c
à l 3
A 3 = ´
3
a c a + ´
3
b c b + ´
3
c c c
La résolution de ce système, qui correspond à une matrice [3 × 3], permet de trouver les
trois concentrations cherchées c a , c b et c c .
c 1
c 2
c 3
=
A 1
A 2
A 3
·
´
1
a ´
1
b ´
1
c
´
2
a ´
2
b ´
2
c
´
3
a ´
3
b ´
3
c
−1
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