8 • Électrophorèse capillaire et électrochromatographie
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La séparation des espèces anioniques est très courante en ECHP. Généralement on inverse les pôles de l’alimentation, le détecteur étant alors du côté anodique. Le flux électroosmotique est ainsi inversé. Seuls seront détectés les anions dont les m EP seront supérieures
à m EOS (fig.8 .6).
minutes
anions :
1 bromure
2 chlorure
3 ferrocyanure
4 nitrite
5 nitrate
6 sulfate
7 azoture
8 oxalate
9 molybdate
10 tungstate
12 fluorure
13 tartrate
16 phosphate
17 citraconate
19 carbonate
20 acetate
24 propionate
26 crotonate
28 butyrate
31 valerate
33 caproate
37 gluconate
Figure 8.6 Un électrophorégramme.
Séparation d’un mélange complexe d’anions. La non symétrie des pics souvent observée (voir aussi figure 8.2) provient des variations du champ électrique tout au long du
capillaire par suite de compositions ioniques variables. Seuls les anions les plus courants
sont indiqués (reproduit avec l’autorisation de la société ATI Unicam).
8.3 INSTRUMENTATION
8.3.1 Modes d’injection
Pour introduire un microvolume d’échantillon, qui ne doit pas dépasser 1 % de la longueur
utile du capillaire sous peine de voir la résolution diminuer, deux procédés sont utilisés :
➤ l’injection hydrostatique. Elle consiste à plonger l’extrémité du capillaire dans l’échantillon en solution (également un électrolyte) et à provoquer une aspiration à l’autre extrémité. On peut améliorer le procédé en exerçant une pressurisation d’environ 50 mbar sur
la solution échantillon.
➤ l’injection par électromigration. Elle est utilisable en électrophorèse sur gel, et consiste
à immerger pendant un certain temps l’extrémité du capillaire dans l’échantillon porté à
un potentiel (50 mV/cm) dont on choisit la polarité par rapport à l’autre extrémité. Par
opposition avec le procédé précédent, ce mode d’injection provoque une action discriminante sur les composés présents, qui conduit à faire l’analyse sur une fraction dont la
composition est différente de celle de l’échantillon de départ. Cette méthode est optimisée
pour chaque mélange.
© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit
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La séparation des espèces anioniques est très courante en ECHP. Généralement on inverse les pôles de l’alimentation, le détecteur étant alors du côté anodique. Le flux électroosmotique est ainsi inversé. Seuls seront détectés les anions dont les m EP seront supérieures
à m EOS (fig.8 .6).
minutes
anions :
1 bromure
2 chlorure
3 ferrocyanure
4 nitrite
5 nitrate
6 sulfate
7 azoture
8 oxalate
9 molybdate
10 tungstate
12 fluorure
13 tartrate
16 phosphate
17 citraconate
19 carbonate
20 acetate
24 propionate
26 crotonate
28 butyrate
31 valerate
33 caproate
37 gluconate
Figure 8.6 Un électrophorégramme.
Séparation d’un mélange complexe d’anions. La non symétrie des pics souvent observée (voir aussi figure 8.2) provient des variations du champ électrique tout au long du
capillaire par suite de compositions ioniques variables. Seuls les anions les plus courants
sont indiqués (reproduit avec l’autorisation de la société ATI Unicam).
8.3 INSTRUMENTATION
8.3.1 Modes d’injection
Pour introduire un microvolume d’échantillon, qui ne doit pas dépasser 1 % de la longueur
utile du capillaire sous peine de voir la résolution diminuer, deux procédés sont utilisés :
➤ l’injection hydrostatique. Elle consiste à plonger l’extrémité du capillaire dans l’échantillon en solution (également un électrolyte) et à provoquer une aspiration à l’autre extrémité. On peut améliorer le procédé en exerçant une pressurisation d’environ 50 mbar sur
la solution échantillon.
➤ l’injection par électromigration. Elle est utilisable en électrophorèse sur gel, et consiste
à immerger pendant un certain temps l’extrémité du capillaire dans l’échantillon porté à
un potentiel (50 mV/cm) dont on choisit la polarité par rapport à l’autre extrémité. Par
opposition avec le procédé précédent, ce mode d’injection provoque une action discriminante sur les composés présents, qui conduit à faire l’analyse sur une fraction dont la
composition est différente de celle de l’échantillon de départ. Cette méthode est optimisée
pour chaque mélange.
© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit