120
Partie 1 • Méthodes séparatives
7.5.1 Distribution des masses moléculaires d’un polymère
Un polymère, même chimiquement pur, correspond toujours à un mélange de répartition de
macromolécules de masses différentes. C’est une application classique de la chromatographie d’exclusion que de déterminer pour ce type d’échantillons la distribution moléculaire,
de caractériser la masse la plus probable et la masse moyenne. Il faut que l’étalonnage de la
colonne puis l’analyse proprement dite soient réalisées avec le même débit de phase mobile.
7.5.2 Analyses diverses
La technique est utile pour analyser les échantillons de composition inconnue, susceptibles
de contenir à la fois des polymères et des petites molécules, ce qui est le cas de nombreux
produits commerciaux ou industriels, tels les produits de biodégradation des polymères.
Pour les composés organiques courants qui peuvent être analysés par CLHP ou CPG il
y a moins d’applications, sauf pour les sucres et polysaccharides (fig. 7.6) tels l’amidon, la
pâte à papier, les boissons et certains produits pharmaceutiques.
Séparation d'un sirop de maïs
colonne HPX-42A
éluant : eau
Temp. 85°C
Détection : indice de réfraction
1 : glucose M = 180
2 à 11 :(glucose -18)n
avec compris entre 2 et 1
n
1
M = 180 x -18( -1)
n
n
4
8
12mL
10
5
15
20 mL
Séparation d'un mélange de peptides
colonne Superdex (dextranes)
éluant : eau
Détection UV (214 nm)
1 - cytochrome C
M = 12500
2 - aprotinine
6500
3 - gastrine I
2126
4 - substance P
1348
5 - (gly)6
360
6 - (gly)3
189
7 - glycine
75
vi
v M
1
2
3
4
5
6
7
8
11-9
1
2
3
4
5
6 7
Figure 7.6 Chromatogrammes de filtration sur gel.
À gauche, séparation d’un mélange d’oligomères du glucose allant du premier terme
(le glucose, M = 180), jusqu’à une vingtaine d’unités (M environ 3 000) (reproduit avec
l’autorisation de Polymer Lab.). À droite, séparation d’un mélange de diverses protéines
et oligomères de la glycine (reproduit avec l’autorisation de Pharmacia-Biotech).
QUELQUES SITES SUR INTERNET
www.alltech.com
www.shimadzu.com
www.jascoinc.com
www.richardscientific.com
www.polymerlabs.com
www.dionex.com
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7.5.1 Distribution des masses moléculaires d’un polymère
Un polymère, même chimiquement pur, correspond toujours à un mélange de répartition de
macromolécules de masses différentes. C’est une application classique de la chromatographie d’exclusion que de déterminer pour ce type d’échantillons la distribution moléculaire,
de caractériser la masse la plus probable et la masse moyenne. Il faut que l’étalonnage de la
colonne puis l’analyse proprement dite soient réalisées avec le même débit de phase mobile.
7.5.2 Analyses diverses
La technique est utile pour analyser les échantillons de composition inconnue, susceptibles
de contenir à la fois des polymères et des petites molécules, ce qui est le cas de nombreux
produits commerciaux ou industriels, tels les produits de biodégradation des polymères.
Pour les composés organiques courants qui peuvent être analysés par CLHP ou CPG il
y a moins d’applications, sauf pour les sucres et polysaccharides (fig. 7.6) tels l’amidon, la
pâte à papier, les boissons et certains produits pharmaceutiques.
Séparation d'un sirop de maïs
colonne HPX-42A
éluant : eau
Temp. 85°C
Détection : indice de réfraction
1 : glucose M = 180
2 à 11 :(glucose -18)n
avec compris entre 2 et 1
n
1
M = 180 x -18( -1)
n
n
4
8
12mL
10
5
15
20 mL
Séparation d'un mélange de peptides
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éluant : eau
Détection UV (214 nm)
1 - cytochrome C
M = 12500
2 - aprotinine
6500
3 - gastrine I
2126
4 - substance P
1348
5 - (gly)6
360
6 - (gly)3
189
7 - glycine
75
vi
v M
1
2
3
4
5
6
7
8
11-9
1
2
3
4
5
6 7
Figure 7.6 Chromatogrammes de filtration sur gel.
À gauche, séparation d’un mélange d’oligomères du glucose allant du premier terme
(le glucose, M = 180), jusqu’à une vingtaine d’unités (M environ 3 000) (reproduit avec
l’autorisation de Polymer Lab.). À droite, séparation d’un mélange de diverses protéines
et oligomères de la glycine (reproduit avec l’autorisation de Pharmacia-Biotech).
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www.jascoinc.com
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