7 • Chromatographie d’exclusion stérique
121
EXERCICES
Solutions en fin d’ouvrage
Exercice 7.1
On chromatographie une solution dans le tétrahydrofuranne (THF) d’un mélange de polystyrènes de masses moléculaires connues sur une colonne (DI = 7,5 mm, L = 300 mm)
dont le domaine de perméation s’étend de 400 à 30 000 daltons. La phase éluante est du
THF. Son débit est de 1 mL/min. La détection UV est effectuée à 254 nm.
À partir du chromatogramme obtenu reproduit ci-après :
4
5
6
7
8
9 min
34500
9200 3250 580
162
a) Calculer le volume d’exclusion totale (volume interstitiel) et le volume des pores de la
colonne utilisée.
b) Calculer le coefficient de diffusion K pour le composé de masse 3 250 Da.
On observe quelquefois en CES des valeurs de K supérieures à 1. Interpréter ce phénomène
Exercice 7.2
On veut séparer par chromatographie de perméation de gel, un mélange de 4 étalons de
polystyrène dont les masses moléculaires sont de 9 200, 76 000, 1,1 × 10
6 et 3 × 10
6
daltons. On dispose de 3 colonnes dont les domaines de perméation sont les suivants :
A : 70 000 à 4 × 10
5 Da ; B : 10 5 à 1,2 × 10
6 Da ; C : 10 6 à 4 × 10
6 Da
Comment peut-on séparer ces 4 polymères en une seule opération, sachant qu’on peut
mettre bout à bout deux colonnes ?
Exercice 7.3
En chromatographie d’exclusion stérique, après injection de polystyrènes étalons, on trouve
une relation entre masse molaire et temps de rétention de la forme suivante :
log M = 5,865 + 1,411 t R − 0,333 t
2
R + 0,016 t
3
R
(1)
où M est la masse molaire en Dalton et t R le temps de rétention en min.
a) Calculer, à partir de cette relation, la masse molaire d’un soluté qui éluerait avec un temps
de rétention égal à 7,48 min dans l’hypothèse où ce polymère est monomasse.
© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit
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EXERCICES
Solutions en fin d’ouvrage
Exercice 7.1
On chromatographie une solution dans le tétrahydrofuranne (THF) d’un mélange de polystyrènes de masses moléculaires connues sur une colonne (DI = 7,5 mm, L = 300 mm)
dont le domaine de perméation s’étend de 400 à 30 000 daltons. La phase éluante est du
THF. Son débit est de 1 mL/min. La détection UV est effectuée à 254 nm.
À partir du chromatogramme obtenu reproduit ci-après :
4
5
6
7
8
9 min
34500
9200 3250 580
162
a) Calculer le volume d’exclusion totale (volume interstitiel) et le volume des pores de la
colonne utilisée.
b) Calculer le coefficient de diffusion K pour le composé de masse 3 250 Da.
On observe quelquefois en CES des valeurs de K supérieures à 1. Interpréter ce phénomène
Exercice 7.2
On veut séparer par chromatographie de perméation de gel, un mélange de 4 étalons de
polystyrène dont les masses moléculaires sont de 9 200, 76 000, 1,1 × 10
6 et 3 × 10
6
daltons. On dispose de 3 colonnes dont les domaines de perméation sont les suivants :
A : 70 000 à 4 × 10
5 Da ; B : 10 5 à 1,2 × 10
6 Da ; C : 10 6 à 4 × 10
6 Da
Comment peut-on séparer ces 4 polymères en une seule opération, sachant qu’on peut
mettre bout à bout deux colonnes ?
Exercice 7.3
En chromatographie d’exclusion stérique, après injection de polystyrènes étalons, on trouve
une relation entre masse molaire et temps de rétention de la forme suivante :
log M = 5,865 + 1,411 t R − 0,333 t
2
R + 0,016 t
3
R
(1)
où M est la masse molaire en Dalton et t R le temps de rétention en min.
a) Calculer, à partir de cette relation, la masse molaire d’un soluté qui éluerait avec un temps
de rétention égal à 7,48 min dans l’hypothèse où ce polymère est monomasse.
© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit