Chapitre III : Matériels et méthodes
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Les tubes sont placés au bain Marie à 30°C pendant 20 minutes, puis ils sont refroidis sous l’eau
de robinet à 20°C. L’absorbance est mesurée à 485nm puis on trace la courbe d’étalonnage.
C. Préparation des échantillons :
Peser 0.1g de chaque échantillon (60 échantillons) dans des fioles de 50 ml et compléter d’eau
distillée. Prendre 10 ml de chaque solution, mettre dans des tubes à essai, ajouter 1ml de phénol et
5ml d’acide sulfurique H2SO4.
Les tubes sont placés au bain Marie à 30° C pendant 20 minutes, puis ils sont refroidis au
réfrigérateur.
Après refroidissement, la densité optique (absorbance) des échantillons est mesurée à 485nm
contre le blanc de la série étalon par spectrophotométrie.
La concentration en glucides (mg/ml) dans chaque échantillon est tirée de l’équation obtenue de
la courbe d’étalonnage des glucides (Fig. III.24, Annexe III).
III.2.7. Evaluation de la contamination des poissons :
Divers méthodes ont été développées pour évaluer la contamination des produits de la pêche et de
l’aquaculture (US EPA, 1998 et ASTEE, 2003). Ainsi, deux approches sont souvent utilisées, la
première est basée sur le lien entre la concentration du contaminant dans l’organisme et sa
concentration dans le milieu ambiant, c’est le facteur de bioaccumulation.
La deuxième approche fait le lien directement avec le consommateur, tout en évaluant et en
caractérisant le risque sanitaire. Les deux méthodes seront appliquées dans la présente étude.
III.2.7.1. Facteur de bioaccumulation (BAF)
Le facteur de bioaccumulation (BAF) est le rapport entre la concentration d’un contaminant dans
des tissus d’un organisme et sa concentration provenant du sédiment (Arnot and Gobas, 2006).
FBC = Cb/Ce
(22)
Où Cb = concentration en éléments traces dans l’espèce ; Ce = concentration environnementale
(eau). Les deux sont exprimées en mg/kg.
III.2.7.2. Méthode d’évaluation des risques sanitaires :
L’évaluation des risques sanitaires liés à la consommation des poissons pollués par les éléments
traces métalliques suivra quatre principales étapes (Gay et al., 2007) :
Identification du danger.
Choix des valeurs toxicologiques de référence (VTR) (Bisson et al., 2009)
Évaluation de l’exposition de la population.
Calcul de la dose journalière d’exposition (DJE) et du Quotient de danger (QD).
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Les tubes sont placés au bain Marie à 30°C pendant 20 minutes, puis ils sont refroidis sous l’eau
de robinet à 20°C. L’absorbance est mesurée à 485nm puis on trace la courbe d’étalonnage.
C. Préparation des échantillons :
Peser 0.1g de chaque échantillon (60 échantillons) dans des fioles de 50 ml et compléter d’eau
distillée. Prendre 10 ml de chaque solution, mettre dans des tubes à essai, ajouter 1ml de phénol et
5ml d’acide sulfurique H2SO4.
Les tubes sont placés au bain Marie à 30° C pendant 20 minutes, puis ils sont refroidis au
réfrigérateur.
Après refroidissement, la densité optique (absorbance) des échantillons est mesurée à 485nm
contre le blanc de la série étalon par spectrophotométrie.
La concentration en glucides (mg/ml) dans chaque échantillon est tirée de l’équation obtenue de
la courbe d’étalonnage des glucides (Fig. III.24, Annexe III).
III.2.7. Evaluation de la contamination des poissons :
Divers méthodes ont été développées pour évaluer la contamination des produits de la pêche et de
l’aquaculture (US EPA, 1998 et ASTEE, 2003). Ainsi, deux approches sont souvent utilisées, la
première est basée sur le lien entre la concentration du contaminant dans l’organisme et sa
concentration dans le milieu ambiant, c’est le facteur de bioaccumulation.
La deuxième approche fait le lien directement avec le consommateur, tout en évaluant et en
caractérisant le risque sanitaire. Les deux méthodes seront appliquées dans la présente étude.
III.2.7.1. Facteur de bioaccumulation (BAF)
Le facteur de bioaccumulation (BAF) est le rapport entre la concentration d’un contaminant dans
des tissus d’un organisme et sa concentration provenant du sédiment (Arnot and Gobas, 2006).
FBC = Cb/Ce
(22)
Où Cb = concentration en éléments traces dans l’espèce ; Ce = concentration environnementale
(eau). Les deux sont exprimées en mg/kg.
III.2.7.2. Méthode d’évaluation des risques sanitaires :
L’évaluation des risques sanitaires liés à la consommation des poissons pollués par les éléments
traces métalliques suivra quatre principales étapes (Gay et al., 2007) :
Identification du danger.
Choix des valeurs toxicologiques de référence (VTR) (Bisson et al., 2009)
Évaluation de l’exposition de la population.
Calcul de la dose journalière d’exposition (DJE) et du Quotient de danger (QD).