Chapitre III : Matériel et Méthodes
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 Remplir la colonne à moitié avec l’hexane, couvrir avec une feuille de papier
aluminium traité
 Mettre 5 g de gel de silice mélangé avec l’hexane dans la colonne.
 Frapper sur la colonne pour que la silice soit bien tassée.
 Laisser descendre le niveau d’hexane sans assécher la colonne.
 Mettre 5 g d’alumine mélangé avec l’hexane en procédant de la même façon qu’avec
la silice.
 Frapper celle-ci sur la colonne pour tasser l’alumine au maximum.
 Laisser descendre le niveau d’hexane sans assécher la colonne.
 Ajouter 0,5 g de Na 2 SO 4 en tête de la colonne pour l’absorption des gouttelettes d’eau
si elles existent encore.
a)-Purification de la fraction aliphatique
 Verser l’échantillon après l’avoir agité.
 Ajouter 20ml d’hexane puis récupérer la fraction 1 aliphatique dans un tube à essai
conditionné auparavant.
 Fermer avec du téflon puis conserver au frais.
b)-Purification de la fraction aromatique
 Ajouter 20 ml du mélange hexane-dichlorométhane dans des proportions (90/10) + 30
ml du mélange hexane-dichlorométhane dans les proportions (70/30) puis récupérer la
fraction 2 aromatique.
 Faire une deuxième concentration à l’évaporateur rotatif (Température : 40°C,
Pression : 1,5 bars).
 Conserver au frais.
Figure III.18 : préparation de la colonne
Figure III.19 : Purification et fractionnement
pour chromatographie
par chromatographie sur colonne ouverte