Chapitre 3
Matériels et Méthodes
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c. Recherche des germes pathogènes :
La recherche des Salmonelles et des Vibrions est effectuer par la méthode qualitative,
réaliser en trois étapes successives : Enrichissement, isolement et identification biochimique
(RODIER et al, 2005).
1. Les salmonelles :
 Enrichissement :
Le milieu d’enrichissement des salmonelles est le bouillon au sélénite de sodium
« SFB » qui favorise leur développement plus abondamment que les coliformes Gram (-)
en 24 heures sous l’action du sélénite de sodium (DELARRAS et TREBAOL, 2003).
La figure 19 résume les différentes étapes de cet enrichissement :
Après avoir obtenue une culture éventuellement enrichie en salmonelles, il faudra ensuite
faire des isolements sur des milieux sélectifs d’isolement pour salmonelles.
Figure 19 : Technique d’enrichissement des salmonelles dans l’eau par la méthode MF.
 Isolement :
L’isolement se fait par ensemencement du milieu sélectif solide SS (gélose Salmonelles,
Shigelles) à partir du bouillon d’enrichissement « SFB » puis incubation à 37°C pendant
24 heures.
 Lecture et interprétation du milieu :
Le milieu SS contient trois inhibiteurs :
-Sels biliaires ;
-vert brillant ;
-forte concentration en citrate de sodium.
Filtration de 200 ml
de l’échantillon sur
une membrane
filtrante.
Membrane
filtrante +
bouillon SFB +
additif SFB
Incubation à 35
±2°C pendant
18 à 48 heures
Membrane
filtrante +
bouillon SFB +
additif SFB