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II-1-3-1 Test de l’effet des souches probiotiques et pathogènes sur la culture d’artémie
L’effet de la charge bactérienne des souches probiotiques et pathogènes a été testé sur la
culture d’artémie (140 nauplii) comme décrit précédemment. Les concentrations finales des
souches étudiées ont été 10
6 , 10
7 , 10
8 UFC/ml.
Un volume de 0.1ml de chaque solution mère et cette dilution a été ensemencé sur la gélose
Mac-conckey pour le dénombrement des souches pathogènes et la gélose MRS pour le
dénombrement des souches probiotiques. Les boites ont été incubées à 37°C pendant 24h
(Villamil et al., 2003).
L’appréciation de l’effet des souches sur l’artémie a été estimée par le suivi de la survie, la
taille, le poids, la biomasse ainsi que la détermination du paramètres CL50 qui seront
présentés plus loin.
II-1-3-2 Test d’essai pour déterminer l’effet des souches probiotiques sur le contrôle des
souches pathogènes
Pour évaluer l’effet des souches bactériennes sur la culture d’Artémia(l’expérience pendent
6jours); différents essais ont été réalisé :
1). Essai Probiotique:
✓ Dans des tubes à essais stériles, 1ml d’artémia a été placé dans 9 ml d’eau d’élevage
contenant l’une des souches probiotiques à une charge de 10
8 UFC/ml : Enterococcus
faecium, Enterococcus durans et Psychrobacter cibarius.
2).Essai pathogène :
✓ Dans des tubes à essais stériles, 1ml d’artémia a été placé dans 9 ml d’eau d’élevage
contenant l’une des souches pathogènes à une charge de 10
8 UFC/ml : Vibrio anguillarum
ATCC 12964 ou Vibrio alginolyticus ATCC17749T.
3).Contrôle de probiotique +pathogène :
✓ Dans des tubes à essais stériles, 1ml d’artémia a été placé dans 9 ml d’eau d’élevage
contenant un mélange de souche pathogène (10
6 UFC/ml) et une souche probiotique
(10
8 UFC/ml). Les combinaisons effectuées ont été :
- Artémia + Enterococcus faecium+ Vibrio anguillarum,
- Artémia + Enterococcus durans + Vibrio anguillarum,
II-1-3-1 Test de l’effet des souches probiotiques et pathogènes sur la culture d’artémie
L’effet de la charge bactérienne des souches probiotiques et pathogènes a été testé sur la
culture d’artémie (140 nauplii) comme décrit précédemment. Les concentrations finales des
souches étudiées ont été 10
6 , 10
7 , 10
8 UFC/ml.
Un volume de 0.1ml de chaque solution mère et cette dilution a été ensemencé sur la gélose
Mac-conckey pour le dénombrement des souches pathogènes et la gélose MRS pour le
dénombrement des souches probiotiques. Les boites ont été incubées à 37°C pendant 24h
(Villamil et al., 2003).
L’appréciation de l’effet des souches sur l’artémie a été estimée par le suivi de la survie, la
taille, le poids, la biomasse ainsi que la détermination du paramètres CL50 qui seront
présentés plus loin.
II-1-3-2 Test d’essai pour déterminer l’effet des souches probiotiques sur le contrôle des
souches pathogènes
Pour évaluer l’effet des souches bactériennes sur la culture d’Artémia(l’expérience pendent
6jours); différents essais ont été réalisé :
1). Essai Probiotique:
✓ Dans des tubes à essais stériles, 1ml d’artémia a été placé dans 9 ml d’eau d’élevage
contenant l’une des souches probiotiques à une charge de 10
8 UFC/ml : Enterococcus
faecium, Enterococcus durans et Psychrobacter cibarius.
2).Essai pathogène :
✓ Dans des tubes à essais stériles, 1ml d’artémia a été placé dans 9 ml d’eau d’élevage
contenant l’une des souches pathogènes à une charge de 10
8 UFC/ml : Vibrio anguillarum
ATCC 12964 ou Vibrio alginolyticus ATCC17749T.
3).Contrôle de probiotique +pathogène :
✓ Dans des tubes à essais stériles, 1ml d’artémia a été placé dans 9 ml d’eau d’élevage
contenant un mélange de souche pathogène (10
6 UFC/ml) et une souche probiotique
(10
8 UFC/ml). Les combinaisons effectuées ont été :
- Artémia + Enterococcus faecium+ Vibrio anguillarum,
- Artémia + Enterococcus durans + Vibrio anguillarum,