Deuxième chapitre : Matériel et méthodes
43
8. Recherche de Salmonella :
La recherche de Salmonella se fait selon plusieurs étapes, elle a été effectuée selon
les recommandations de JOFFIN et JOFFIN, 2010 (Voir Figure N°12).
Mode opératoire :
Pré enrichissement :
 Peser 25g de la chair et ajouter 225ml d’eau peptonée tamponnée.
 Broyer le contenu à l’aide d’un robot mixeur stérile pendant 2 mn et le verser
aseptiquement dans un flacon stérile, puis incuber à 37°C pendant 24heures.
Enrichissement :
 Pour l’enrichissement sélectif nous avons utilisé le bouillon au sélénite et à la
cystéine (BSC),
 Mettre 1 ml de bouillon de pré enrichissement dans un tube contenant 10 ml de BSC,
incuber ensuite à 37°C pendant 24h.
Ensemencement :
 Les cultures de BSC sont repiquées sur la gélose Hektoen et sur la gélose SS,
 L’ensemencement du milieu est effectué par stries, et incuber à 37°C pendant
24heures.
Lecture :
Les colonies de Salmonella présumées apparaissent vertes ou bleues avec ou sans
centre noir sur gélose Hektoen et transparentes avec ou sans centre noir sur gélose
SS. La coloration noir est due à la formation de H2S.
Identification :
Se fait par une identification morphologique et biochimique :
 Aspect des colonies sur milieu sélectif.
 Coloration de Gram (bacille Gram-).
 Test de catalase (catalase+)