Deuxième chapitre : Matériel et méthodes
42
7. Recherche et dénombrement des anaérobies sulfito-réducteurs
Il a été réalisé suivant la norme AFNOR (NF V08-061, Décembre 2009)
Mode opératoire :
 Placer la suspension mère et les dilutions dans un bain marie à 80°C pendant 10
minutes pour éliminer toutes les formes végétatives,
 Refroidir immédiatement les tubes sous l’eau de robinet (faisant un choc thermique),
 Ajouter 15 ml de la gélose viande-foie en surfusion additionnée des additifs sulfites
de sodium et alun de fer (20 gouttes pour chacun des additifs),
 Laisser solidifier puis incuber à 37°C pendant 24 à 48h.
Lecture : Dénombrer les colonies noires
Colonies noires
Figure 11 : Technique de recherche et du dénombrement des germes sulfito-réducteurs AFNOR
(NF V08-061, Décembre 2009)
SM 10
-1
1 ml
Traitement à la chaleur (80°C) pendant
10 mn puis mettre les tubes
brusquement sous l’eau de robinet
Ajouter 15 ml de gélose VF + additifs :
sulfites de sodium et alun de fer
Incubation à 37°C
pendant 24 à 48h