Deuxième chapitre : Matériel et méthodes
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6. Recherche et dénombrement des Staphylocoques présumés
pathogènes
Réalisé suivant la méthode horizontale de la norme AFNOR (NF V08-057-1,2004)
Milieu de culture utilisé est Baird Parker (BP).
Mode opératoire :
La recherche de Staphylococcus aureus se fait sur la gélose Baird Parker additionnée
au jaune d’œuf et au tellurite de potassium. Le milieu est ensemencé en surface avec
0,1 ml de la suspension mère et les dilutions. L’inoculum est ensuite étalé à l’aide
d’un râteau en verre. L’incubation se fait à 37°C pendant 48h.
Lecture :
Les colonies de Staphylococcus aureus apparaissent sur le milieu Baird Parker noires
(réduction du tellurite en tellure), bombées, rondes et entourées d’un halo
d’éclaircissement, un liseré blanc opaque (précipitation des acides gras produits par
la lécithinase qui hydrolyse la lécithine du jaune d’œuf).
Identification :
Les colonies noires suspectées, entourées d’un halo clair doivent subir différents tests
qui consistent en :
Une coloration de Gram
Un test de la catalase
Un test de la coagulase
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6. Recherche et dénombrement des Staphylocoques présumés
pathogènes
Réalisé suivant la méthode horizontale de la norme AFNOR (NF V08-057-1,2004)
Milieu de culture utilisé est Baird Parker (BP).
Mode opératoire :
La recherche de Staphylococcus aureus se fait sur la gélose Baird Parker additionnée
au jaune d’œuf et au tellurite de potassium. Le milieu est ensemencé en surface avec
0,1 ml de la suspension mère et les dilutions. L’inoculum est ensuite étalé à l’aide
d’un râteau en verre. L’incubation se fait à 37°C pendant 48h.
Lecture :
Les colonies de Staphylococcus aureus apparaissent sur le milieu Baird Parker noires
(réduction du tellurite en tellure), bombées, rondes et entourées d’un halo
d’éclaircissement, un liseré blanc opaque (précipitation des acides gras produits par
la lécithinase qui hydrolyse la lécithine du jaune d’œuf).
Identification :
Les colonies noires suspectées, entourées d’un halo clair doivent subir différents tests
qui consistent en :
Une coloration de Gram
Un test de la catalase
Un test de la coagulase