Chapitre II
Matériel & méthodes
45
II.3.2.1.4.Recherche et dénombrement des staphylocoques pathogènes à coagulase
poisitive
Tous les staphylocoques présents dans les aliments ne sont pas entérotoxinogènes. Ce n’est
que depuis peu que l’on admet le rôle de S. aureus comme germe indicateur de contamination
humaine (ou animale ou originelle) dans les aliments (aliments crus en particulier).
Cette notion permet donc d’accepter des staphylocoques en petit nombre dans les aliments.
Ces germes sont naturellement présents sur la peau et les muqueuses de l’homme et des
animaux avec des charges qui peuvent largement dépasser les 100 000 germes par cm
2 .
L’identification de S.aureusrepose surtout sur la recherche de l’activité coagulase et ADNase
(thermonucléase) et sur la recherche de protéines à activités particulières.
- Parmi les coques Gram+, catalase+, seuls les Staphylococcus aureus possèdent une
plasma coagulase (coagulation de plasma oxalaté de lapin en moins de 24 h). La
production de coagulase permet de différencier S. aureus de S. epidermidis et des
Micrococcus.
- La thermonucléase est recherchée par cette méthode après traitement de l’inoculum à
100°C pendant 15 minutes et dépôt de 5 à 10 µl d’inoculum dans des puits creusés à
l’emporte pièce. Après 4 h d’incubation à 37°C, la gélose ADN préalablement
additionnée de 3 ml de bleu de toluidine 0,1 M par litre devient rose autour des puits
contenant la thermonucléase
Les souches de Staphylococcus pathogènes coagulent en général le plasma de lapin et les
staphylocoques coagulase négative ne produisent qu’exceptionnellement des entérotoxines.
La présence d’une ADNase thermostable semble être en bonne corrélation avec le pouvoir
entérotoxinogène des germes.
Matériel & méthodes
45
II.3.2.1.4.Recherche et dénombrement des staphylocoques pathogènes à coagulase
poisitive
Tous les staphylocoques présents dans les aliments ne sont pas entérotoxinogènes. Ce n’est
que depuis peu que l’on admet le rôle de S. aureus comme germe indicateur de contamination
humaine (ou animale ou originelle) dans les aliments (aliments crus en particulier).
Cette notion permet donc d’accepter des staphylocoques en petit nombre dans les aliments.
Ces germes sont naturellement présents sur la peau et les muqueuses de l’homme et des
animaux avec des charges qui peuvent largement dépasser les 100 000 germes par cm
2 .
L’identification de S.aureusrepose surtout sur la recherche de l’activité coagulase et ADNase
(thermonucléase) et sur la recherche de protéines à activités particulières.
- Parmi les coques Gram+, catalase+, seuls les Staphylococcus aureus possèdent une
plasma coagulase (coagulation de plasma oxalaté de lapin en moins de 24 h). La
production de coagulase permet de différencier S. aureus de S. epidermidis et des
Micrococcus.
- La thermonucléase est recherchée par cette méthode après traitement de l’inoculum à
100°C pendant 15 minutes et dépôt de 5 à 10 µl d’inoculum dans des puits creusés à
l’emporte pièce. Après 4 h d’incubation à 37°C, la gélose ADN préalablement
additionnée de 3 ml de bleu de toluidine 0,1 M par litre devient rose autour des puits
contenant la thermonucléase
Les souches de Staphylococcus pathogènes coagulent en général le plasma de lapin et les
staphylocoques coagulase négative ne produisent qu’exceptionnellement des entérotoxines.
La présence d’une ADNase thermostable semble être en bonne corrélation avec le pouvoir
entérotoxinogène des germes.