Chapitre II
Matériel & méthodes
40
solution protéique à doser, il se lie aux protéines présentes et aux groupements aromatiques ce
qui a pour effet de déplacer sa principale raie d’absorption à 595nm. L’absorbance du
rayonnement visible à 595nm est mesurée par un détecteur, et permet de doser indirectement
la teneur en protéine de la solution à l’aide d’une courbe d’étalonnage en BSA
Préparation du réactif de Bradford : diluer le réactif de Bradford au 1/10
Préparation de la gamme étalon BSA (Bovine Serum Albumin) :
- préparer une solution mère de BSA (1mg /ml)
- préparer une gamme de BSA de 0 à100 µg
-ajouter le réactif de Bradford
Préparation de l’échantillon
- 25g de la chair est additionnée de 225ml de solvant, le tout est finement broyé.
- En même temps que la préparation de la gamme étalon, une série de tubes, contenant
différents volumes de prise d'essai de l’échantillon à doser, est préparée.
Lecture :
- lire les absorbances à 595 nm
-déterminer la concentration des échantillons en protéine en utilisant la courbe étalon
II.3.1.1.4. Dosage de l’azote bisque volatil total (ABVT) et de la triméthylamine(TAM)
par la méthode de BLANCHARD et PANTHALEON(1951)
Dosage de l’azote basique volatil total (ABVT) :
Principe :
Dans le processus de putréfaction des poissons, la dégradation des protéines sous l’action
des enzymes bactériennes entraîne la formation de bases azotées volatiles. Ainsi, le
dosage de l’ABVT permet de rendre compte, de façon objective, du degré d’altération des
poissonsLes bases volatiles sont déplacées à l’aide de MgO entrainement à la vapeur, et le
condensat est recueilli dans de l’acide sulfurique en présence d’un indicateur coloré. On
les titres à l’aide de NaOH à 0.1. les résultats sont exprimés en mg d’ammonaic pour 100g
du produit frais.
Technique :
Peser 5 à 10 g (+/-0.02g) suivant la nature du produit. Faire homogénéiser.
-Ajouter 150 ml d’eau distillé, 20 à 30 ml d’oxyde de magnésium à 5%, 1ou 2 ml d’antimousse.
- Mettre le ballon pour distillation.
Matériel & méthodes
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solution protéique à doser, il se lie aux protéines présentes et aux groupements aromatiques ce
qui a pour effet de déplacer sa principale raie d’absorption à 595nm. L’absorbance du
rayonnement visible à 595nm est mesurée par un détecteur, et permet de doser indirectement
la teneur en protéine de la solution à l’aide d’une courbe d’étalonnage en BSA
Préparation du réactif de Bradford : diluer le réactif de Bradford au 1/10
Préparation de la gamme étalon BSA (Bovine Serum Albumin) :
- préparer une solution mère de BSA (1mg /ml)
- préparer une gamme de BSA de 0 à100 µg
-ajouter le réactif de Bradford
Préparation de l’échantillon
- 25g de la chair est additionnée de 225ml de solvant, le tout est finement broyé.
- En même temps que la préparation de la gamme étalon, une série de tubes, contenant
différents volumes de prise d'essai de l’échantillon à doser, est préparée.
Lecture :
- lire les absorbances à 595 nm
-déterminer la concentration des échantillons en protéine en utilisant la courbe étalon
II.3.1.1.4. Dosage de l’azote bisque volatil total (ABVT) et de la triméthylamine(TAM)
par la méthode de BLANCHARD et PANTHALEON(1951)
Dosage de l’azote basique volatil total (ABVT) :
Principe :
Dans le processus de putréfaction des poissons, la dégradation des protéines sous l’action
des enzymes bactériennes entraîne la formation de bases azotées volatiles. Ainsi, le
dosage de l’ABVT permet de rendre compte, de façon objective, du degré d’altération des
poissonsLes bases volatiles sont déplacées à l’aide de MgO entrainement à la vapeur, et le
condensat est recueilli dans de l’acide sulfurique en présence d’un indicateur coloré. On
les titres à l’aide de NaOH à 0.1. les résultats sont exprimés en mg d’ammonaic pour 100g
du produit frais.
Technique :
Peser 5 à 10 g (+/-0.02g) suivant la nature du produit. Faire homogénéiser.
-Ajouter 150 ml d’eau distillé, 20 à 30 ml d’oxyde de magnésium à 5%, 1ou 2 ml d’antimousse.
- Mettre le ballon pour distillation.