Chapitre 02
méthodologie
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au jaune(Figure23). Les absorbances mesurées à 517 nm servent à calculer le pourcentage
d’inhibition du radical DPPH, qui est proportionnel au pouvoir anti-radicalaire de
l’échantillon(Parejo et al. 2002).
a. Mesure de la capacité anti-oxydante
 2ml de solution éthanolique de DPPH (0,1 mM) fraîchement préparée est ajouté à 2 ml
d’une série de dilution d’un échantillon d’hydrolysat protéique, le mélange est
vigoureusement agité, puis les tube sont incubés à température ambiante et à l’obscurité
pendant 30 min. L’absorbance est mesurée à 517 nm en utilisant un spectrophotomètre Jasco
V-630. L’acide ascorbique (Aa) est utilisé comme référence.
b. Calcule des pourcentages d’inhibition du DPPH :
Formule suivante :
………….(12)
I% : pourcentage d’inhibition
Ac: absorbance du contrôle (solution de DPPH sans échantillon).
Ae: absorbance de l’échantillon.
c. Calcule de concentrationinhibitriceIC 50 :
La IC 50 ou concentration inhibitrice de 50% (aussi appelée EC 50 pour Efficient
concentration 50), est la concentration de l’échantillon testé nécessaire pour réduire 50% des
radicaux DPPH. Les IC 50 sont calculées graphiquement par les régressions linéaires des
droites tracées: pourcentage d’inhibition en fonction de différentes concentrations de
Figure23 :Piégeage du radical DPPH par un antioxydant(Popovici et
al. 2009)
I%=((Ac – Ae)/Ac) x100