MATERIEL ET METHODES
24
Figure 3: Les différentes étapes d’isolement des bactéries à partir du tube digestif de S.
officinalis
Gélose au
Cétrimide
Isolement en
surface
Isolement
sélectif des
Pseudomonas
et apparentés
Isolement des
Enterobactéries
et autres Gram
négatif
Repiquage de deux fois a
été effectué sur du BHI A
(BRAIN HEART INFUSION
AGAR) pour obtenir des
cultures pures.
Conservation des souches
en réalisant un
ensemencement par
piqure centrale dans des
tubes de conservation.
Poisson dans un sac en
plastique.
Dépôt du poisson dans
un bécher stérile.
Désinfection de la
surface du poisson par
l’éthanol à 96%.
Incision et prélèvement
des intestins à l’aide
d’un Scalpel et une
pince préalablement
désinfectés.
Broyage de 25g
Dépôt des intestins
dans un flacon stérile à
l’ordre de 25g/125ml
d’eau physiologique
Homogénéiser à l’aide
d’un Vortex à flacon
pendant quelques
minutes.
Obtention de la
solution mère.
Gélose
Mac Conkey
Incubation
à 37°
pendant
24H
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Figure 3: Les différentes étapes d’isolement des bactéries à partir du tube digestif de S.
officinalis
Gélose au
Cétrimide
Isolement en
surface
Isolement
sélectif des
Pseudomonas
et apparentés
Isolement des
Enterobactéries
et autres Gram
négatif
Repiquage de deux fois a
été effectué sur du BHI A
(BRAIN HEART INFUSION
AGAR) pour obtenir des
cultures pures.
Conservation des souches
en réalisant un
ensemencement par
piqure centrale dans des
tubes de conservation.
Poisson dans un sac en
plastique.
Dépôt du poisson dans
un bécher stérile.
Désinfection de la
surface du poisson par
l’éthanol à 96%.
Incision et prélèvement
des intestins à l’aide
d’un Scalpel et une
pince préalablement
désinfectés.
Broyage de 25g
Dépôt des intestins
dans un flacon stérile à
l’ordre de 25g/125ml
d’eau physiologique
Homogénéiser à l’aide
d’un Vortex à flacon
pendant quelques
minutes.
Obtention de la
solution mère.
Gélose
Mac Conkey
Incubation
à 37°
pendant
24H
