Partie II
Matériel et méthodes
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Tableau 6 : Recherche de la catalase.
2.5.4 Dénombrement des Sulfito-réducteurs
Ce test permet de mettre en évidence une pollution fécale ancienne, en effet, le caractère
sporulant de ces germes sont plus résistantes que les autres formes (RODIER et al, 1996).
La technique de recherche des sulfito-réducteurs est résumée dans le tableau ci-dessous :
Tableau 7 : méthode de recherche des sulfito-réducteurs
Mode opératoire
Résultats
Aspect du tube positif
 La gélose viande foie (VF)
est régénérée par ébullition au
bain Marie.
 Une ampoule d’Alun de fer
et une autre de sulfite de
sodium sont ajoutées à 250 ml
de gélose.
 Les tubes contenants 2 ml
de solution mère ou de
dilution sont maintenus à
80°C au bain Marie 5 à 10
minutes.
 On ajoute 18 ml de la gélose
(VF) à l’aide d’une pipette
stérilisée.
 Laisser refroidir.
 Les tubes sont incubés à
37°C pendant 24 heures.
Les résultats sont directement
obtenus par le comptage des
spores qui ont germées.
Ces résultats sont exprimés en
(spores / 20 ml).
Aspect du test positif
Techniques
Résultats
 Sur une lame
propre et
séchée, déposer
une goutte d’eau
oxygénée à 10
volumes.
 A l’aide d’une
pipette Pasteur,
ajouter un
fragment d’une
colonie
bactérienne
isolée.
 Observer
immédiatement.
- Apparition de bulles,
dégagement gazeux de
dioxygène : catalase (+).
- Pas de bulles : catalase (–).