Matériel et méthodes
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 Le nombre de tubes positifs est noté, puis reporté dans la table du nombre le plus
probable NPP, afin de déterminer le nombre de coliformes fécaux et d’Escherichia
coli (Delarras, 2003).
II.2.3.1.2.3. Recherche et dénombrement des Enterococcus
Le dénombrement des Streptocoques fécaux s’effectue en deux étapes :
-Test présomptif
Il s’agit d’ensemencer une série de tubes contenant le milieu de Rothe simple
concentration. Le milieu de Rothe contient de l’azide de sodium qui est considéré comme
agent sélectif pour la recherche des Streptocoques (Delarras 2003).
1
ère
série : 3 tubes de 10 ml de Rothe + 1 ml de la solution mère.
2
ème
série : 3 tubes de 10 ml de Rothe + 1 ml de la solution 10
-1
.
3
ème
série : 3 tubes de 10ml de Rothe + 1 ml de la solution 10
-2
.
L’incubation se fait à 37 °C pendant 48 heures, les tubes présentant un trouble sont
présomptifs de la présence des Streptocoques fécaux.
-Test confirmatif
Chaque tube positif est ensemencé sur le milieu de Litsky qui contient non seulement
de l’azide de sodium mais également de l’éthyle violet donc plus sélectif pour la mise
en évidence les streptocoques fécaux.
L’incubation s’effectue pendant 24 heures à 35±2°C. Les tubes présentant un
trouble accompagné ou non d’une pastille violette au fond du tube confirment la présence des
Streptocoques fécaux. Les résultats sont exprimés en nombre de Streptocoques par 100 g de
chair et de liquide intervalvaire à analyser en se référant à la table NPP (Delarras, 2003).
II.2.3.1.3. Recherche des germes pathogènes : Salmonella
La recherche des salmonelles a été effectuée dans 25 g de chair et de liquide intervalvaire pour
la moule. La méthode utilisée comprend 4 phases successives :
-Un préenrichissement : Ajouter 75ml de la suspension mère à 75ml d’eau peptonée tamponnée
stérile Puis incuber à 37 °C pendant 18h.