Matériel et méthodes
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II.2.3.Analyse microbiologique
II.2.3.1. Analyse microbiologique de la moule
II.2.3.1.1. Préparation de la moule (homogénat)
L’analyse est effectuée sur la chair et le liquide intervalvaire. Les moules sont traitées
comme suit (Delarras, 2003):
- Prendre des coquillages encore vivants et non endommagés.
- Laver soigneusement l’extérieur des coquillages sous eau courante et les brosser de façon
à éliminer les souillures externes.
- Désinfecter la moule par l’alcool et la flamber rapidement à la chaleur.
- Ouvrir la moule avec un couteau ou un scalpel stérile. Pour ce faire : introduire la lame
dans l’ouverture par où sort le byssus (figure 7) et couper le muscle adducteur postérieur,
puis retourner la lame, couper en direction opposée le muscle et ouvrir la moule avec des
pinces stériles (OMS, 1995).
- Recueillir le liquide intervalvaire et la chair du coquillage dans un bécher stérile et
préalablement taré.
- Peser et ajouter un volume d’eau physiologique égal à deux fois le poids de chair plus
le liquide intervalvaire (100g pour les germes fécaux et 25g pour les germes
pathogène : Salmonella).
- Broyer le contenu recueilli à l’aide d’un robot mixeur stérile pendant 2 min, on obtient une
suspension au 1/3 qui constitue la solution mère.
- Laisser reposer pendant 15-20 min la suspension préparée, temps de revivification des germes.
Préparation des dilutions
Á partir de la suspension mère au 1/3, préparer une série de deux dilutions (1/10, 1/100)
dans deux flacons contenant 45ml d’eau physiologique.
Figure 7 : Dissection de la moule
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II.2.3.Analyse microbiologique
II.2.3.1. Analyse microbiologique de la moule
II.2.3.1.1. Préparation de la moule (homogénat)
L’analyse est effectuée sur la chair et le liquide intervalvaire. Les moules sont traitées
comme suit (Delarras, 2003):
- Prendre des coquillages encore vivants et non endommagés.
- Laver soigneusement l’extérieur des coquillages sous eau courante et les brosser de façon
à éliminer les souillures externes.
- Désinfecter la moule par l’alcool et la flamber rapidement à la chaleur.
- Ouvrir la moule avec un couteau ou un scalpel stérile. Pour ce faire : introduire la lame
dans l’ouverture par où sort le byssus (figure 7) et couper le muscle adducteur postérieur,
puis retourner la lame, couper en direction opposée le muscle et ouvrir la moule avec des
pinces stériles (OMS, 1995).
- Recueillir le liquide intervalvaire et la chair du coquillage dans un bécher stérile et
préalablement taré.
- Peser et ajouter un volume d’eau physiologique égal à deux fois le poids de chair plus
le liquide intervalvaire (100g pour les germes fécaux et 25g pour les germes
pathogène : Salmonella).
- Broyer le contenu recueilli à l’aide d’un robot mixeur stérile pendant 2 min, on obtient une
suspension au 1/3 qui constitue la solution mère.
- Laisser reposer pendant 15-20 min la suspension préparée, temps de revivification des germes.
Préparation des dilutions
Á partir de la suspension mère au 1/3, préparer une série de deux dilutions (1/10, 1/100)
dans deux flacons contenant 45ml d’eau physiologique.
Figure 7 : Dissection de la moule
