Chapitre deuxièmes :
Matérielles et méthodes
22
II.2.4.2. Prélèvement bactériologique :
Le traitement des poissons et les prélèvements ont été effectués en respectant toutes les règles
d’hygiène et d’asepsie. Tout le matériel ayant servi à la préparation et à la dissection des
poissons a été stérilisé à l’étuve à 170° C pendant une heure.
Pour chaque poisson nous avons procédé à 3 prélèvements différents :
Le premier a consisté à passer l’écouvillon sur toute la surface de la peau. Alors que le second
a consisté à écouvillonner l’abdomen après dissection du poisson en respectant toutes les règles
d’hygiène et d’asepsie.
Le 3
ème prélèvement a été réalisé au niveau des branchies. En premier lieu, nous avons
écouvillonné les branchies, ensuite à l’aide de ciseaux stériles nous avons coupé les opercules.
Puis nous avons prélevé les branchies au moyen de pinces stériles. A la fin nous les avons
déposé à la surface des boites de Pétri.
L’observation à l’œil nu des branchies révèle une coloration rouge pourpre, l’absence de
syndrome anémique, d’hémorragies, de lésions nécrotiques (pourriture des branchies).
L’observation de la masse viscérale révèle des organes internes saints, l’absence
d’hémorragies, de signes inflammatoires et de kystes.
II.2.4.3. Mises en culture des germes :
Les ensemencements concernant la peau, la surface des branchies et l’intérieur de l’abdomen
ont été réalisés par écouvillonnage des surfaces des géloses. Alors que les branchies ont été
directement déposées à la surface des différents milieux de culture.
Les 30 boîtes par échantillons sont ensemencées, placées en position renversée pour éviter la
condensation de l’eau sur le couvercle, puis incubées aux températures appropriées.
II.2.4.4. Recherche de Pseudomonas aeruginosa
II.2.4.4.1. Recherche de Pseudomonas aeruginosa sur les milieux King A et B
Mode opératoire :
La recherche de P. aeruginosa s’effectue par dépôt des branchies et par ensemencement
(écouvillonnage) en surface des milieux king A puis King B. Ce milieu permet une
identification rapide de cette espèce. Pérez et al, 1989.
Matérielles et méthodes
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II.2.4.2. Prélèvement bactériologique :
Le traitement des poissons et les prélèvements ont été effectués en respectant toutes les règles
d’hygiène et d’asepsie. Tout le matériel ayant servi à la préparation et à la dissection des
poissons a été stérilisé à l’étuve à 170° C pendant une heure.
Pour chaque poisson nous avons procédé à 3 prélèvements différents :
Le premier a consisté à passer l’écouvillon sur toute la surface de la peau. Alors que le second
a consisté à écouvillonner l’abdomen après dissection du poisson en respectant toutes les règles
d’hygiène et d’asepsie.
Le 3
ème prélèvement a été réalisé au niveau des branchies. En premier lieu, nous avons
écouvillonné les branchies, ensuite à l’aide de ciseaux stériles nous avons coupé les opercules.
Puis nous avons prélevé les branchies au moyen de pinces stériles. A la fin nous les avons
déposé à la surface des boites de Pétri.
L’observation à l’œil nu des branchies révèle une coloration rouge pourpre, l’absence de
syndrome anémique, d’hémorragies, de lésions nécrotiques (pourriture des branchies).
L’observation de la masse viscérale révèle des organes internes saints, l’absence
d’hémorragies, de signes inflammatoires et de kystes.
II.2.4.3. Mises en culture des germes :
Les ensemencements concernant la peau, la surface des branchies et l’intérieur de l’abdomen
ont été réalisés par écouvillonnage des surfaces des géloses. Alors que les branchies ont été
directement déposées à la surface des différents milieux de culture.
Les 30 boîtes par échantillons sont ensemencées, placées en position renversée pour éviter la
condensation de l’eau sur le couvercle, puis incubées aux températures appropriées.
II.2.4.4. Recherche de Pseudomonas aeruginosa
II.2.4.4.1. Recherche de Pseudomonas aeruginosa sur les milieux King A et B
Mode opératoire :
La recherche de P. aeruginosa s’effectue par dépôt des branchies et par ensemencement
(écouvillonnage) en surface des milieux king A puis King B. Ce milieu permet une
identification rapide de cette espèce. Pérez et al, 1989.