Généralités
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Les étapes suivantes sont recommandées pour la préparation de l’extrait de chlorophylle. En ne
laissant que le culot qui contient les cellules micro-algues qui sont lavées avec de l’eau distillé et
centrifugées une autre fois. Puis faire suspendre les cellules dans 4 ml de méthanol à 100%. Le
tube est mis à l’obscurité, les cellules se détruisent et il ne reste que les plastes qui contiennent de
la chlorophylle.
Dans certains cas, un bref chauffage est nécessaire pour réaliser l’extraction du pigment complet
Après que les débris cellulaires sont éliminés par centrifugation ou filtration, l’extrait de pigment
dans un spectrophotomètre (UV-visible) à des longueurs d’onde (470, 652.4 et 665.2 nm). La
quantité des pigments est calculée selon les équations suivantes (Formule de Lichtenthaler, 1987)
[Cha]= 16.72 DO 665.2-9.16 DO 652.4
[Chb]= 34.09 DO 652.4 -15.28 DO 665.2
[Cha+b]= 1.44 DO 665.2 + 24.93 DO 652.4
Caroténoïdes = (1000 DO 470 –1,63 ] ِ◌Cha]- 104.96 ] ِ◌Chb]) / 221
4-La récolte
A la fin de la phase exponentielle et au début de la phase stationnaire de la croissance des microalgues, la biomasse micro-algale doit être récupérée en utilisant deux techniques.
4-1-La centrifugation
Dans des conditions aseptiques et à côté du bec bunsen en utilisant des tubes à centrifugeuse
stérile remplis avec de la culture, puis on centrifuge à 5000 tour pendant 15 min .Le milieu de
culture est jeté en laissant que le culot qui contient des cellules micro-algales. Les étapes ont été
répétées jusqu’à la fin de la biomasse. A la fin les culots ont été récupérés avec une pipette
pasteur dans des boites pétri stériles et congelées à une température -4C° (Person, 2010).
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Les étapes suivantes sont recommandées pour la préparation de l’extrait de chlorophylle. En ne
laissant que le culot qui contient les cellules micro-algues qui sont lavées avec de l’eau distillé et
centrifugées une autre fois. Puis faire suspendre les cellules dans 4 ml de méthanol à 100%. Le
tube est mis à l’obscurité, les cellules se détruisent et il ne reste que les plastes qui contiennent de
la chlorophylle.
Dans certains cas, un bref chauffage est nécessaire pour réaliser l’extraction du pigment complet
Après que les débris cellulaires sont éliminés par centrifugation ou filtration, l’extrait de pigment
dans un spectrophotomètre (UV-visible) à des longueurs d’onde (470, 652.4 et 665.2 nm). La
quantité des pigments est calculée selon les équations suivantes (Formule de Lichtenthaler, 1987)
[Cha]= 16.72 DO 665.2-9.16 DO 652.4
[Chb]= 34.09 DO 652.4 -15.28 DO 665.2
[Cha+b]= 1.44 DO 665.2 + 24.93 DO 652.4
Caroténoïdes = (1000 DO 470 –1,63 ] ِ◌Cha]- 104.96 ] ِ◌Chb]) / 221
4-La récolte
A la fin de la phase exponentielle et au début de la phase stationnaire de la croissance des microalgues, la biomasse micro-algale doit être récupérée en utilisant deux techniques.
4-1-La centrifugation
Dans des conditions aseptiques et à côté du bec bunsen en utilisant des tubes à centrifugeuse
stérile remplis avec de la culture, puis on centrifuge à 5000 tour pendant 15 min .Le milieu de
culture est jeté en laissant que le culot qui contient des cellules micro-algales. Les étapes ont été
répétées jusqu’à la fin de la biomasse. A la fin les culots ont été récupérés avec une pipette
pasteur dans des boites pétri stériles et congelées à une température -4C° (Person, 2010).