Généralités
36
Les cellules comptées sur 1 mm2 de surface correspondront à 0,1 mm3 de culture. Dans le cas de
cellules mobiles, il faut fixer 'l'échantillon par du formol ou des cristaux d'iode. Le comptage au
microscope a l'avantage de permettre un contrôle de l'état des cultures, mais il ne tient pas compte
de la dimension de chaque cellule, qui peut varier de façon très importante.
3-4-2-Le volume cellulaire
On fait passer les échantillons dans une centrifugeuse et on mesure le volume du culot, la mesure
est facilitée si le fond des bols de centrifugation est long et étroit (Le Borgne, 1978).
3-4-3-La mesure du poids sec
Après centrifugation d'un volume assez important, on peut sécher l'échantillon au four. C'est une
mesure précise pour comparer plusieurs cultures entre elles (Fiala, 1979) mais le processus est
long et ne permet pas un diagnostic rapide (Jaque 1978).
3-4-4-La densité optique (dosage de chlorophylle)
Un spectrophotomètre mesure la pénétration de radiations d'une longueur d'onde donnée à travers
un échantillon contenu dans une cuve en quartz. Cette méthode nécessite un appareillage
relativement complexe, mais on peut établir une correspondance entre la densité optique et la
concentration cellulaire une variante consiste à mesurer la teneur en chlorophylle (Neveux, in
Jacques, 1978). Les teneurs en pigment de chaque cellule peuvent varier selon les conditions de
culture (Barnabé, 1989).
3-4-5-Dosage des chlorophylles
Etant donné que les micro-algues contiennent de la chlorophylle, l’estimation de ce pigment est
bien élaborée, méthode fiable pour le calcul de la biomasse algale.
Selon la souche des micro-algues examinée, les solvants comme l’acétone (80% ou 100 %)
l’éthanol (Sartory 1982; Bekker ,1994) ou le diéthyléther (Bikker, 1994) sont utilisés pour
extraire le pigment des cellules de micro-algues. Selon Stewart (1974) et Sartory (1982), le
méthanol est aussi utilisé comme un solvant pour l’extraction des pigments à partir des microalgues. Marker (1972), a trouvé que le méthanol est un meilleur solvant d’extraction des
chlorophylles.
36
Les cellules comptées sur 1 mm2 de surface correspondront à 0,1 mm3 de culture. Dans le cas de
cellules mobiles, il faut fixer 'l'échantillon par du formol ou des cristaux d'iode. Le comptage au
microscope a l'avantage de permettre un contrôle de l'état des cultures, mais il ne tient pas compte
de la dimension de chaque cellule, qui peut varier de façon très importante.
3-4-2-Le volume cellulaire
On fait passer les échantillons dans une centrifugeuse et on mesure le volume du culot, la mesure
est facilitée si le fond des bols de centrifugation est long et étroit (Le Borgne, 1978).
3-4-3-La mesure du poids sec
Après centrifugation d'un volume assez important, on peut sécher l'échantillon au four. C'est une
mesure précise pour comparer plusieurs cultures entre elles (Fiala, 1979) mais le processus est
long et ne permet pas un diagnostic rapide (Jaque 1978).
3-4-4-La densité optique (dosage de chlorophylle)
Un spectrophotomètre mesure la pénétration de radiations d'une longueur d'onde donnée à travers
un échantillon contenu dans une cuve en quartz. Cette méthode nécessite un appareillage
relativement complexe, mais on peut établir une correspondance entre la densité optique et la
concentration cellulaire une variante consiste à mesurer la teneur en chlorophylle (Neveux, in
Jacques, 1978). Les teneurs en pigment de chaque cellule peuvent varier selon les conditions de
culture (Barnabé, 1989).
3-4-5-Dosage des chlorophylles
Etant donné que les micro-algues contiennent de la chlorophylle, l’estimation de ce pigment est
bien élaborée, méthode fiable pour le calcul de la biomasse algale.
Selon la souche des micro-algues examinée, les solvants comme l’acétone (80% ou 100 %)
l’éthanol (Sartory 1982; Bekker ,1994) ou le diéthyléther (Bikker, 1994) sont utilisés pour
extraire le pigment des cellules de micro-algues. Selon Stewart (1974) et Sartory (1982), le
méthanol est aussi utilisé comme un solvant pour l’extraction des pigments à partir des microalgues. Marker (1972), a trouvé que le méthanol est un meilleur solvant d’extraction des
chlorophylles.