Généralités
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3-2-La purification des cultures
Quand les cultures unialgales sont développées, on cherche ensuite à éliminer les bactéries pour
les rendre axéniques, pour cela, on peut les laver par migration dans un milieu contenant des
antibiotiques introduites à une extrémité d'un tube éclairé seulement à l'autre extrémité, les
cellules des algues mobiles vont être attirées par la lumière (Barnabé ,1989). Des cultures sur
milieux solides contenant des antibiotiques (pénicilline G, streptomycine sulfate,
chloramphénicol) peuvent servir également à obtenir des colonies algales débarrassées des
bactéries (Le Borgne, 1986).
3-3- Les cultures mères
Une collection de cultures mères est un bien précieux et vital pour le fonctionnement de
l'ensemble de la production. Les pertes par contamination (mauvaise manipulation) ou accident
(mauvaise régulation thermique, erreur dans la préparation du milieu) sont donc à redouter : pour
diminuer les risques, il est souhaitable de conserver deux séries de souches, l'une servant à la
production, l'autre ne subissant que les manipulations nécessaires à son entretien et n'étant utilisée
qu'en cas de défaillance de la souche de production. Des contrôles périodiques au microscope
permettent de vérifier qu'il n'y a pas eu contamination d'une espèce algale par une autre, lors des
manipulations (Barnabé, 1989).
3-4-Le contrôle du développement algal
Il existe plusieurs moyens d'évaluation de la quantité de micro-algues présentées dans les
cultures, soit par comptage du nombre de cellules, soit par leur volume, leur coloration, leur
poids.
3-4-1-Les numérations
On peut utiliser un compteur de particules ou compteur au microscope â l'aide d'un
hémacytomètre. Dans ce dernier cas, une goutte est introduite par capillarité entre la lame de
l'hémacytomètre et la lamelle couvre-objet.
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3-2-La purification des cultures
Quand les cultures unialgales sont développées, on cherche ensuite à éliminer les bactéries pour
les rendre axéniques, pour cela, on peut les laver par migration dans un milieu contenant des
antibiotiques introduites à une extrémité d'un tube éclairé seulement à l'autre extrémité, les
cellules des algues mobiles vont être attirées par la lumière (Barnabé ,1989). Des cultures sur
milieux solides contenant des antibiotiques (pénicilline G, streptomycine sulfate,
chloramphénicol) peuvent servir également à obtenir des colonies algales débarrassées des
bactéries (Le Borgne, 1986).
3-3- Les cultures mères
Une collection de cultures mères est un bien précieux et vital pour le fonctionnement de
l'ensemble de la production. Les pertes par contamination (mauvaise manipulation) ou accident
(mauvaise régulation thermique, erreur dans la préparation du milieu) sont donc à redouter : pour
diminuer les risques, il est souhaitable de conserver deux séries de souches, l'une servant à la
production, l'autre ne subissant que les manipulations nécessaires à son entretien et n'étant utilisée
qu'en cas de défaillance de la souche de production. Des contrôles périodiques au microscope
permettent de vérifier qu'il n'y a pas eu contamination d'une espèce algale par une autre, lors des
manipulations (Barnabé, 1989).
3-4-Le contrôle du développement algal
Il existe plusieurs moyens d'évaluation de la quantité de micro-algues présentées dans les
cultures, soit par comptage du nombre de cellules, soit par leur volume, leur coloration, leur
poids.
3-4-1-Les numérations
On peut utiliser un compteur de particules ou compteur au microscope â l'aide d'un
hémacytomètre. Dans ce dernier cas, une goutte est introduite par capillarité entre la lame de
l'hémacytomètre et la lamelle couvre-objet.