CHAPITRE I
Généralités
21
í µí¼ : Le coefficient d'extinction en fonction de λ en (L mol-1 cm- 1)
l : La longueur du trajet optique dans la solution traversée, correspondant à l’épaisseur de la cuve
utilisée (1 cm)
c : La concentration molaire de la solution (en mol/L)
La loi de Beer-Lambert n’est applicable que pour des radiations monochromatiques et pour des
solutions suffisamment diluées dans la limite de la linéarité.
III.3.Méthode d’identification qualitative : Chromatographie sur couche mince (CCM)
Parmi les techniques utilisées pour l’analyse qualitative des caroténoïdes, on retrouve la
chromatographie sur couche mince (CCM) qui est une méthode d’analyse simple, rapide,
polyvalente et peu coûteuse. Elle permet la séparation, l’isolement, l’identification et la
quantification des différents constituants d’une substance complexe. (FRIED et al., 1982).
Elle utilise un équilibre hétérogène établi pendant l’écoulement d’un solvant pur ou d’un mélange
de solvants appelé phase mobile à travers une phase stationnaire qui est un solide actif appelé
sorbant (de nombreux sorbants sont disponible, mais généralement on utilise le gel de silice qui
sera fixé sur un support solide de feuille de verre, d'aluminium ou de plastique) pour séparer deux
ou plusieurs composants d’un échantillon transporté par le solvant (FRIED et al., 1994).
Les composants de l'échantillon interagissent à la fois avec les phases stationnaires et mobiles
selon que le mécanisme est dominé par le processus d’adsorption ou d’absorption. Dans le
premier cas, le mécanisme est appelé chromatographie d'adsorption et dans le second cas,
chromatographie de partage (TOUCHSTONE et al., 1983).
Le facteur principal dans toutes formes de chromatographie est le rapport frontal « Rating
Factor » appelé Rf. Ceci est défini comme le quotient obtenu en divisant la distance parcourue
par la substance échantillon et la distance parcourue par le solvant.
í µí± í µí± =
la distance parcourue par la substance échantillon (a)
la distance parcourue par le solvant (b)
Le résultat obtenu est une grandeur sans unité et toujours inferieur a 1 : 0 ˂ Rf ˂ 1.
Généralités
21
í µí¼ : Le coefficient d'extinction en fonction de λ en (L mol-1 cm- 1)
l : La longueur du trajet optique dans la solution traversée, correspondant à l’épaisseur de la cuve
utilisée (1 cm)
c : La concentration molaire de la solution (en mol/L)
La loi de Beer-Lambert n’est applicable que pour des radiations monochromatiques et pour des
solutions suffisamment diluées dans la limite de la linéarité.
III.3.Méthode d’identification qualitative : Chromatographie sur couche mince (CCM)
Parmi les techniques utilisées pour l’analyse qualitative des caroténoïdes, on retrouve la
chromatographie sur couche mince (CCM) qui est une méthode d’analyse simple, rapide,
polyvalente et peu coûteuse. Elle permet la séparation, l’isolement, l’identification et la
quantification des différents constituants d’une substance complexe. (FRIED et al., 1982).
Elle utilise un équilibre hétérogène établi pendant l’écoulement d’un solvant pur ou d’un mélange
de solvants appelé phase mobile à travers une phase stationnaire qui est un solide actif appelé
sorbant (de nombreux sorbants sont disponible, mais généralement on utilise le gel de silice qui
sera fixé sur un support solide de feuille de verre, d'aluminium ou de plastique) pour séparer deux
ou plusieurs composants d’un échantillon transporté par le solvant (FRIED et al., 1994).
Les composants de l'échantillon interagissent à la fois avec les phases stationnaires et mobiles
selon que le mécanisme est dominé par le processus d’adsorption ou d’absorption. Dans le
premier cas, le mécanisme est appelé chromatographie d'adsorption et dans le second cas,
chromatographie de partage (TOUCHSTONE et al., 1983).
Le facteur principal dans toutes formes de chromatographie est le rapport frontal « Rating
Factor » appelé Rf. Ceci est défini comme le quotient obtenu en divisant la distance parcourue
par la substance échantillon et la distance parcourue par le solvant.
í µí± í µí± =
la distance parcourue par la substance échantillon (a)
la distance parcourue par le solvant (b)
Le résultat obtenu est une grandeur sans unité et toujours inferieur a 1 : 0 ˂ Rf ˂ 1.