CHAPITRE II. MATERIEL ET METHODES
42
Lecture et interprétation (selon LEBRES et al (2002))
Après 24 heures d’incubation, les coliformes totaux et fécaux apparaissent sous forme de petites
colonies jaunes ou orangées, lisses, légèrement bombées. Etant donné le caractère sélectif de la
gélose TTC ; ne pousseront théoriquement que les coliformes.
- Ne dénombrer que les boites refermant entre 15 et 300 colonies.
- Le nombre de colonies trouvées sera exprimé dans 100 ml d’eau à analyser.
5.2.2. Streptométrie en milieu solide par méthode de filtration sur membranes
Principe et mode opératoire (figure II.19).
La streptométrie (dénombrement des streptocoques fécaux) par filtration est tout comme la
colimétrie par filtration une méthode rapide, simple, normalisée mais nécessitant la disponibilité
d’une rampe de filtration. Le mode opératoire est le même que celui décrit en colimétie sauf que
cette fois la gélose utilisée est SLANETZ et BARTLEY.
En effet, une fois les 100 ml de l’échantillon est filtré, la membrane est retirée à l’aide d’une
pince stérile et la placer dans une boite de Pétri de 45 mm de diamètre contenant de la gélose
SLANETZ et BARTLEY. Cette membrane sera incubée à 37°C, pendant 24 heures (LEBRES et
al ,2002).
Lecture et interprétation (selon LEBRES et al (2002)).
Après 24 heures d’incubation, les streptocoques fécaux apparaissent sous forme de petites
colonies rouges, marron ou roses, lisses, légèrement bombées. Etant donné le caractère sélectif
de la gélose SLANETZ ; ne pousseront théoriquement que les streptocoques fécaux.
- Test confirmatif : Les membranes sont retirées et déposées sur gélose bile esculine agar
BEA. Après 20 à 50 min les colonies rouges des streptocoques fécaux deviendront noires.
Si les colonies appartiennent à un autre genre Bacillus, elles seront plus claires (gris
clair).
- Ne dénombrer que les boites refermant entre 15 et 300 colonies.
- Le nombre de colonies trouvées sera exprimé dans 100 ml d’eau à analyser.
5.2.3. Recherche et dénombrement des staphylocoques pathogènes à coagulase
positive par filtration sur membranes (figure II.19).
Principe et mode opératoire
Le principe est le même que celui qui a été décrit précédemment sauf que cette fois la gélose
utilisée est CHAPMAN.
42
Lecture et interprétation (selon LEBRES et al (2002))
Après 24 heures d’incubation, les coliformes totaux et fécaux apparaissent sous forme de petites
colonies jaunes ou orangées, lisses, légèrement bombées. Etant donné le caractère sélectif de la
gélose TTC ; ne pousseront théoriquement que les coliformes.
- Ne dénombrer que les boites refermant entre 15 et 300 colonies.
- Le nombre de colonies trouvées sera exprimé dans 100 ml d’eau à analyser.
5.2.2. Streptométrie en milieu solide par méthode de filtration sur membranes
Principe et mode opératoire (figure II.19).
La streptométrie (dénombrement des streptocoques fécaux) par filtration est tout comme la
colimétrie par filtration une méthode rapide, simple, normalisée mais nécessitant la disponibilité
d’une rampe de filtration. Le mode opératoire est le même que celui décrit en colimétie sauf que
cette fois la gélose utilisée est SLANETZ et BARTLEY.
En effet, une fois les 100 ml de l’échantillon est filtré, la membrane est retirée à l’aide d’une
pince stérile et la placer dans une boite de Pétri de 45 mm de diamètre contenant de la gélose
SLANETZ et BARTLEY. Cette membrane sera incubée à 37°C, pendant 24 heures (LEBRES et
al ,2002).
Lecture et interprétation (selon LEBRES et al (2002)).
Après 24 heures d’incubation, les streptocoques fécaux apparaissent sous forme de petites
colonies rouges, marron ou roses, lisses, légèrement bombées. Etant donné le caractère sélectif
de la gélose SLANETZ ; ne pousseront théoriquement que les streptocoques fécaux.
- Test confirmatif : Les membranes sont retirées et déposées sur gélose bile esculine agar
BEA. Après 20 à 50 min les colonies rouges des streptocoques fécaux deviendront noires.
Si les colonies appartiennent à un autre genre Bacillus, elles seront plus claires (gris
clair).
- Ne dénombrer que les boites refermant entre 15 et 300 colonies.
- Le nombre de colonies trouvées sera exprimé dans 100 ml d’eau à analyser.
5.2.3. Recherche et dénombrement des staphylocoques pathogènes à coagulase
positive par filtration sur membranes (figure II.19).
Principe et mode opératoire
Le principe est le même que celui qui a été décrit précédemment sauf que cette fois la gélose
utilisée est CHAPMAN.