CHAPITRE II. MATERIEL ET METHODES
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5. Caractérisation des effluents de DDA traités par biométhanisation
et évapo-concentration.
5.1. Evaluation des paramètres physico-chimiques
Les paramètres physico-chimiques (DCO, DBO5, turbidité, MES, MO, matière minérale, sels
nutritifs et pH) des eaux épurées ont été mesuré en suivant les mêmes protocoles décrits
précédemment (voir paragraphe II.2.1. Paramètres physico-chimiques).
5.2. Evaluation des paramètres microbiologiques
L’effluent DDA ayant subi un double traitement (biométhanistion et évapo-concentration), la
charge microbienne sera relativement faible, c’est pourquoi nous avons opté pour la méthode de
filtration sur membrane pour analyser un volume plus important que la méthode du NPP.
5.2.1. Colimétrie en milieu solide par méthode de filtration sur membranes
Principe
Cette méthode consiste à filtrer un volume d'échantillon déterminé à travers une membrane
stérile de cellulose stérile de porosité de 0,45 µm. Le filtre sur lequel les bactéries ont été
retenues est ensuite déposé sur un milieu de culture solide spécifique de la bactérie recherchée.
Après une incubation à la température souhaitée et pendant un temps donné, les colonies formées
sont comptées. La colimétrie par filtration est une méthode rapide, simple, normalisée mais
nécessitant la disponibilité d’une rampe de filtration et se prête uniquement aux eaux non
chargées sinon on risque d’avoir un colmatage des membranes (GOURMELON, 2002).
Mode opératoire (LEBRES et al (2002)) (figure II.19).
- Tout d’abord, il faudrait stériliser un entonnoir à l’aide d’un bec bunsen.
- Le refroidir soit avec l’eau à analyser ou bien avec de l’eau distillée stérile.
- Mettre en place de façon aseptique une membrane de 0,45 µm entre la membrane poreuse
et l’entonnoir à l’aide d’une pince stérile.
- Fixer ce dernier avec la pince correspondante et remplir de façon aseptique l’entonnoir
avec 100 ml d’eau à analyser.
- Actionner la pompe à vide pour permettre le passage de l’eau à travers la membrane et
retirer ensuite la membrane à l’aide d’une pince stérile et la placer dans une boite de Pétri
de 45 mm de diamètre contenant de la gélose TTC.
- Cette membrane sera incubée à 37°C pour les coliformes totaux et à 44°C pour les
coliformes fécaux, pendant 24 heures.
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5. Caractérisation des effluents de DDA traités par biométhanisation
et évapo-concentration.
5.1. Evaluation des paramètres physico-chimiques
Les paramètres physico-chimiques (DCO, DBO5, turbidité, MES, MO, matière minérale, sels
nutritifs et pH) des eaux épurées ont été mesuré en suivant les mêmes protocoles décrits
précédemment (voir paragraphe II.2.1. Paramètres physico-chimiques).
5.2. Evaluation des paramètres microbiologiques
L’effluent DDA ayant subi un double traitement (biométhanistion et évapo-concentration), la
charge microbienne sera relativement faible, c’est pourquoi nous avons opté pour la méthode de
filtration sur membrane pour analyser un volume plus important que la méthode du NPP.
5.2.1. Colimétrie en milieu solide par méthode de filtration sur membranes
Principe
Cette méthode consiste à filtrer un volume d'échantillon déterminé à travers une membrane
stérile de cellulose stérile de porosité de 0,45 µm. Le filtre sur lequel les bactéries ont été
retenues est ensuite déposé sur un milieu de culture solide spécifique de la bactérie recherchée.
Après une incubation à la température souhaitée et pendant un temps donné, les colonies formées
sont comptées. La colimétrie par filtration est une méthode rapide, simple, normalisée mais
nécessitant la disponibilité d’une rampe de filtration et se prête uniquement aux eaux non
chargées sinon on risque d’avoir un colmatage des membranes (GOURMELON, 2002).
Mode opératoire (LEBRES et al (2002)) (figure II.19).
- Tout d’abord, il faudrait stériliser un entonnoir à l’aide d’un bec bunsen.
- Le refroidir soit avec l’eau à analyser ou bien avec de l’eau distillée stérile.
- Mettre en place de façon aseptique une membrane de 0,45 µm entre la membrane poreuse
et l’entonnoir à l’aide d’une pince stérile.
- Fixer ce dernier avec la pince correspondante et remplir de façon aseptique l’entonnoir
avec 100 ml d’eau à analyser.
- Actionner la pompe à vide pour permettre le passage de l’eau à travers la membrane et
retirer ensuite la membrane à l’aide d’une pince stérile et la placer dans une boite de Pétri
de 45 mm de diamètre contenant de la gélose TTC.
- Cette membrane sera incubée à 37°C pour les coliformes totaux et à 44°C pour les
coliformes fécaux, pendant 24 heures.