Matériel et méthodes
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▪ Lecture : L’effervescence qui en résulte indique la présence de catalase (réaction
positive).
• Test de coagulase :
▪ Principe :
La coagulase est une enzyme qui provoque la formation d'un caillot se forment lorsque les
bactéries sont incubées avec du plasma.
Le test est utilisé pour différencier Staphylococcus aureus (coagulase positif) de
staphylocoques à coagulase négative (HARVEY & al, 2007).
▪ Mode opératoire :
- À l'aide d'une anse stérile, émulsifier 1 à 2 colonies noires sur Baird Parker.
- Mettre la colonie dans un tube à essai contenant 5 ml de bouillon nutritive « BHIB ».
- Mélanger délicatement.
- Incuber à 37°C pendant 24 heures.
- Observer la formation de trouble après incubation.
- Prendre 0.1 ml de la suspension additionnée avec 0.3 ml de plasma du lapin
- Incuber à 37°C pendant 24 heures.
- Observer le tube après incubation s’il y a formation d’un caillot en le penchant
doucement sur le côté.
- Relever les résultats.
▪ Lecture : Après le temps d’incubation, on peut incliner le tube, le plasma reste sous
forme d’un culot (caillot), il n’est donc plus liquide, cela signifie qu’il a coagulé,
donc la souche possède la coagulase (coagulase positif).
Calcul :
Les colonies dénombrées sur la boite sont calculées comme suit :
í µí±µ(í µí±¼í µí±í µí±ª/í µí²í µí²) =
∑í µí°
(í µí±½. í µí¿. í µí¿. í µí² )
Figure 18.Test de catalase.
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▪ Lecture : L’effervescence qui en résulte indique la présence de catalase (réaction
positive).
• Test de coagulase :
▪ Principe :
La coagulase est une enzyme qui provoque la formation d'un caillot se forment lorsque les
bactéries sont incubées avec du plasma.
Le test est utilisé pour différencier Staphylococcus aureus (coagulase positif) de
staphylocoques à coagulase négative (HARVEY & al, 2007).
▪ Mode opératoire :
- À l'aide d'une anse stérile, émulsifier 1 à 2 colonies noires sur Baird Parker.
- Mettre la colonie dans un tube à essai contenant 5 ml de bouillon nutritive « BHIB ».
- Mélanger délicatement.
- Incuber à 37°C pendant 24 heures.
- Observer la formation de trouble après incubation.
- Prendre 0.1 ml de la suspension additionnée avec 0.3 ml de plasma du lapin
- Incuber à 37°C pendant 24 heures.
- Observer le tube après incubation s’il y a formation d’un caillot en le penchant
doucement sur le côté.
- Relever les résultats.
▪ Lecture : Après le temps d’incubation, on peut incliner le tube, le plasma reste sous
forme d’un culot (caillot), il n’est donc plus liquide, cela signifie qu’il a coagulé,
donc la souche possède la coagulase (coagulase positif).
Calcul :
Les colonies dénombrées sur la boite sont calculées comme suit :
í µí±µ(í µí±¼í µí±í µí±ª/í µí²í µí²) =
∑í µí°
(í µí±½. í µí¿. í µí¿. í µí² )
Figure 18.Test de catalase.