30
Collection PCEM / BIOCHIM/E 7
W
Après hydrolyse de ces liaisons, on sépare les chaînes en utilisant leurs
différences de PM (gel ltration) ou de charges (électrophorèse ou chromatographie sur resines).
>( Voir exercice n° 110)
0
Analyse des chaînes :
.
Détermination des acides a-aminés aux extrémités :
N-terminale :
——
AMINOPEŸI‘IDASES
—
méthodes de Sanger ou d’Edman
(Cf. propriétés chimiques).
C—terminale :
-—
CARBOXYPEPTIDASES
—hydrazinolyse (seul l’acide «Je—aminé Cterminal est retrouvé à l’état libre).
-
Coupure des chaines en fragments par hydrolyse des liaisons
pepüdiques par action des enzymes digestives (Cf. introduction) ou par hy—
-
drolyse chimique
(coupure au hasard des liaisons donnant des fragments
pouvant contenir le ou les mêmes acides a-aminés ).
On obtient des fragments qui se chevauchent (puisqu’obtenus par des méthodes différentes). L’analyse séparée de chacun de ces fragments permet d’en
obtenir la séquence. Selon l’ordre de recombinaison de ces fragments, on obtiendra plusieurs séquences possibles du peptide initial. Pour sélectionner la
bonne séquence, il ne reste plus qu’à vérier, pour chacune d’elle, la concordance avec les données expérimentales. (Opération parfois très complexe et
qui nécessite souvent le secours d’un ordinateur).
> (Voir exercices n° 111 à 115}
… DE QUELQUES PEPTIDES
…
a) Le glutathion
:
tripeptide = 7—glutamvl-cystéinyl-glycocolle.
?OOH
N—CH—CH, —CH2 —CO—NH—CH—CO—NH—CŒ —COOH
|
CH2 —SH
Il Joue
un rôle en tant qu’agent réducteur et protège les fonctions thiols
(essentielles à l’activité de certaines enzymes) de l’oxydation.
Hz
2 G—SH