Régime de production primaire dans le bassin algérien : interaction facteurs du milieu successions planctoniques
| Matériel et méthodes
2.2.2.3 Pigments
Les échantillons destinés à l’analyse des pigments ont été collectés sur environ la moitié des
stations (44) selon un rythme d’une station sur deux. L’échantillonnage vertical a consisté en
6 échantillons par station : 5 paliers dans les 100 premiers mètres et un palier « sombre ».
L'échantillonnage de surface a été resserré autour du maximum de chlorophylle (DCM).
Les échantillons ont été filtrés sur des membranes en fibre de verre GF/F de 25 mm, puis
congelés dans l'azote liquide à -80 °C jusqu'à l'analyse.
Les mesures ont été effectuées au Laboratoire d'Océanographie de Villefranche-France (LOV)
selon la procédure décrite dans Ras et al. (2008). Les filtres ont été placés dans 3 ml de
méthanol à 100 % pendant deux heures, interrompues par sonication à deux reprises et
clarifiés par filtration (GF/F Whatman). Les mesures ont été réalisées le même jour par HPLC
2
(HPLC 1200). Lors de l’analyse, le volume d'injection a été réduit à 30 µL en raison de la
forte concentration des extraits. Chaque extrait a été injecté en trois réplicats. La détection des
caroténoïdes et des chlorophylles c et b a été réalisée à 450 nm, celle de la chlorophylle a et de
ses dérivés à 676 nm et celle de la bactériochlorophylle a à 770 nm. La limite de détection
pour un litre filtré (en mg/m
3
) est d'environ 0,0001-0,0002 pour tous les pigments mesurés. La
précision et l'exactitude de l'étalonnage étaient d'environ 0,4 % et 0,3 %, respectivement.
Un contrôle de qualité a été appliqué aux données des pigments en suivant la procédure
décrite par Aiken et al. (2009). Les relations entre la chlorophylle a totale (TChl a) et les
pigments accessoires (AP) ont été utilisées. Les critères statistiques pour l'assurance qualité
des données sur les pigments étaient les suivants :
1. La différence entre TChl a et AP doit être inférieure à 30 % de la concentration totale
en pigments.
2. La régression entre TChl a et AP doit avoir une pente comprise entre 0,7 et 1,4 et doit
expliquer plus de 90 % de la variance totale (r² > 0,9).
Nos données ont montré une différence entre TChl a et AP inférieure à 30 % de la
2High-performance liquid chromatography
45
| Matériel et méthodes
2.2.2.3 Pigments
Les échantillons destinés à l’analyse des pigments ont été collectés sur environ la moitié des
stations (44) selon un rythme d’une station sur deux. L’échantillonnage vertical a consisté en
6 échantillons par station : 5 paliers dans les 100 premiers mètres et un palier « sombre ».
L'échantillonnage de surface a été resserré autour du maximum de chlorophylle (DCM).
Les échantillons ont été filtrés sur des membranes en fibre de verre GF/F de 25 mm, puis
congelés dans l'azote liquide à -80 °C jusqu'à l'analyse.
Les mesures ont été effectuées au Laboratoire d'Océanographie de Villefranche-France (LOV)
selon la procédure décrite dans Ras et al. (2008). Les filtres ont été placés dans 3 ml de
méthanol à 100 % pendant deux heures, interrompues par sonication à deux reprises et
clarifiés par filtration (GF/F Whatman). Les mesures ont été réalisées le même jour par HPLC
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(HPLC 1200). Lors de l’analyse, le volume d'injection a été réduit à 30 µL en raison de la
forte concentration des extraits. Chaque extrait a été injecté en trois réplicats. La détection des
caroténoïdes et des chlorophylles c et b a été réalisée à 450 nm, celle de la chlorophylle a et de
ses dérivés à 676 nm et celle de la bactériochlorophylle a à 770 nm. La limite de détection
pour un litre filtré (en mg/m
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) est d'environ 0,0001-0,0002 pour tous les pigments mesurés. La
précision et l'exactitude de l'étalonnage étaient d'environ 0,4 % et 0,3 %, respectivement.
Un contrôle de qualité a été appliqué aux données des pigments en suivant la procédure
décrite par Aiken et al. (2009). Les relations entre la chlorophylle a totale (TChl a) et les
pigments accessoires (AP) ont été utilisées. Les critères statistiques pour l'assurance qualité
des données sur les pigments étaient les suivants :
1. La différence entre TChl a et AP doit être inférieure à 30 % de la concentration totale
en pigments.
2. La régression entre TChl a et AP doit avoir une pente comprise entre 0,7 et 1,4 et doit
expliquer plus de 90 % de la variance totale (r² > 0,9).
Nos données ont montré une différence entre TChl a et AP inférieure à 30 % de la
2High-performance liquid chromatography
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