Matériels et Méthodes
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• Préparation des tubes :
-Préparer dans un portoir 12 tubes stériles contenant un bouillon lactosé sélectif BCPL avec
un tube de Durham renversé.
-Répartir ces 12 tubes en 3 séries de 3 tubes correspondant aux dilutions 10
-1
, 10
-2
, 10
-3
et
10
-4
. L’opération a été réalisée pour chaque échantillon, un total de 36 tubes a été préparé.
• Inoculation des tubes BCPL (Test présomptif) :
- Transférer aseptiquement 1 ml de chaque dilution (10
-1
, 10
-2
, 10
-3
,10
-4
) dans les 3 tubes
BCPL correspondants.
- Bien mélanger et chasser le gaz des cloches de Durham.
- Incuber les 12 tubes BCPL à 37°C pendant 24 à 48h.
- Observer la production de gaz dans les cloches et le changement de couleurs (tubes
positifs).
• Confirmation sur BLBVB
-Prélever une quantité de 1 ml de chaque tube BCPL positif.
-Ensemencer dans des tubes de BLBVB (Bouillon Lactosé Bile Vert Brillant) avec cloche
de Durham en s’assurant qu’il n’y a aucune bulle de gaz dans la cloche (Figure 36).
-Incuber les tubes BLBVB à 44°C pendant 24 à 48h.
Figure 35: Tubes du milieu BCPL (prise par
BENMEDIOUNI & MANSOUR, 2024)