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III.5.2 Analyse des hydrolysats protéiques Rendement
Le rendement de l'extraction des hydrolysats protéiques représente la proportion de protéines
extraites par rapport à la quantité initiale de matière première utilisée. Ce paramètre est crucial
pour évaluer l'efficacité du processus d'hydrolyse enzymatique. Dans cette étude, le rendement
a été calculé selon la formule suivante :
R=
𝐌𝐌𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦 𝐟𝐟𝐟𝐟 𝐟𝐟𝐦𝐦𝐟𝐟 𝐦𝐦×𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏
𝐌𝐌𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦 𝐟𝐟 𝐟𝐟𝐟𝐟 𝐢𝐢 𝐟𝐟 𝐦𝐦𝐟𝐟 𝐦𝐦
(𝟖𝟖)
Où :
Masse initiale : représente la masse des coproduits utilisés au départ.
Masse finale : correspond à la masse de la gélatine lyophilisée obtenue.
B. Détermination du Degré d'Hydrolyse
Le degré d'hydrolyse (DH) est un indicateur clé pour évaluer la protéolyse des protéines
hydrolysées. Il est défini comme le pourcentage des liaisons peptidiques rompues par rapport
à la quantité totale de liaisons peptidiques présentes dans la protéine originale (Zamora-Sillero
et al., 2018). La méthode employée repose sur la mesure de la concentration de protéines avant
et après traitement avec de l'acide trichloracétique (TCA). Ce traitement provoque la
coagulation des protéines non hydrolysées, permettant ainsi de déterminer le rapport entre les
liaisons peptidiques clivées et celles initialement présentes dans la protéine. Le degré
d'hydrolyse est calculé à l'aide de la formule suivante :
DH (%) =(
𝑷𝑷𝑷𝑷
𝑷𝑷𝑷𝑷
) × í µí¿í µí¿í µí¿í µí¿í µí¿í µí¿
(9)
Où :
PS : les protéines solubles dans le TCA.
PT : les protéines totales.
• Mode opératoire
Après hydrolyse, prélevez 20 ml de l’échantillon d’hydrolysat protéique et ajoutez-y 20 ml de
solution d’acide trichloracétique (TCA) à 20 % (m/v). Centrifugez le mélange à 6000 rpm
pendant 30 minutes pour précipiter les protéines non hydrolysées. Ensuite, retirez le surnageant
et mesurez la concentration des protéines hydrolysées par dosage spectroscopique en suivant
la méthode de (Lowry et al.1951).