Chapitre I : Généralités
18
Généralement la congélation de sperme se déroule en trois phases :
5.2.1 Phase de refroidissement
Réviers et Sauveur (1988) précisent que le sperme est dilué et conservé dans un
environnement sombre à -4°C sans congélation. Au cours de ce processus, les cryoprotecteurs
pénètrent dans les spermatozoïdes, provoquant l’expulsion de l’eau de l’intérieur vers
l’extérieur. Cela permet d'éviter la formation de gros cristaux pendant la congélation. Robeck
et al. (2011) suggèrent trois taux de refroidissement différents.
Les pailles subissent une diminution progressive de température à raison de -10,70°C par
minute. Après avoir été maintenus à une hauteur de 13,5 cm au-dessus du réservoir d'azote
liquide pendant 10 minutes, ils sont ensuite immergés.
La vitesse de refroidissement est enregistrée à une moyenne de -14,62°C par minute. Les
paillettes sont suspendues à une distance de 13,5 cm au-dessus du réservoir d'azote liquide
pendant une durée de 5 minutes, suivies de 5 minutes supplémentaires à une hauteur de 4,5 cm
avant d'être enfin immergées.
Le processus de refroidissement rapide se produit à une vitesse de -15,20°C par minute.
Après avoir été maintenues à une hauteur de 4,5 cm au-dessus du réservoir d'azote liquide
pendant une durée de 10 minutes, les paillettes sont ensuite entièrement immergées.
5.2.2 Phase de conditionnement
L'emballage remplit la fonction essentielle de diviser la graine, la rendant facilement
reconnaissable, stockable et utilisable. Le processus de congélation, utilisant des pailles
immergées dans l'azote liquide, peut être réalisé soit manuellement en présence de vapeurs
d'azote liquide, soit à l'aide d'une machine qui régule la vitesse de refroidissement.
Pour éviter que les pailles n'éclatent pendant le processus de décongélation, il est
nécessaire de créer une bulle d'air à l'intérieur après les avoir remplies de graines. Les pailles
doivent ensuite être positionnées sur un support situé 5 à 7 cm au-dessus de la vapeur d'azote
liquide. Une fois que la température atteint environ -30°C, ce qui est similaire à la température
du sperme, le plateau contenant les paillettes est immergé dans de l'azote liquide à -196°C.
Pour assurer une bonne élimination de l’eau de la cellule tout en évitant la formation de
cristaux intracellulaires, il est crucial de maintenir une diminution progressive de la température
(Legendre et Billard, 1980).
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Généralement la congélation de sperme se déroule en trois phases :
5.2.1 Phase de refroidissement
Réviers et Sauveur (1988) précisent que le sperme est dilué et conservé dans un
environnement sombre à -4°C sans congélation. Au cours de ce processus, les cryoprotecteurs
pénètrent dans les spermatozoïdes, provoquant l’expulsion de l’eau de l’intérieur vers
l’extérieur. Cela permet d'éviter la formation de gros cristaux pendant la congélation. Robeck
et al. (2011) suggèrent trois taux de refroidissement différents.
Les pailles subissent une diminution progressive de température à raison de -10,70°C par
minute. Après avoir été maintenus à une hauteur de 13,5 cm au-dessus du réservoir d'azote
liquide pendant 10 minutes, ils sont ensuite immergés.
La vitesse de refroidissement est enregistrée à une moyenne de -14,62°C par minute. Les
paillettes sont suspendues à une distance de 13,5 cm au-dessus du réservoir d'azote liquide
pendant une durée de 5 minutes, suivies de 5 minutes supplémentaires à une hauteur de 4,5 cm
avant d'être enfin immergées.
Le processus de refroidissement rapide se produit à une vitesse de -15,20°C par minute.
Après avoir été maintenues à une hauteur de 4,5 cm au-dessus du réservoir d'azote liquide
pendant une durée de 10 minutes, les paillettes sont ensuite entièrement immergées.
5.2.2 Phase de conditionnement
L'emballage remplit la fonction essentielle de diviser la graine, la rendant facilement
reconnaissable, stockable et utilisable. Le processus de congélation, utilisant des pailles
immergées dans l'azote liquide, peut être réalisé soit manuellement en présence de vapeurs
d'azote liquide, soit à l'aide d'une machine qui régule la vitesse de refroidissement.
Pour éviter que les pailles n'éclatent pendant le processus de décongélation, il est
nécessaire de créer une bulle d'air à l'intérieur après les avoir remplies de graines. Les pailles
doivent ensuite être positionnées sur un support situé 5 à 7 cm au-dessus de la vapeur d'azote
liquide. Une fois que la température atteint environ -30°C, ce qui est similaire à la température
du sperme, le plateau contenant les paillettes est immergé dans de l'azote liquide à -196°C.
Pour assurer une bonne élimination de l’eau de la cellule tout en évitant la formation de
cristaux intracellulaires, il est crucial de maintenir une diminution progressive de la température
(Legendre et Billard, 1980).