Chapitre I : Généralités
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5.2.3 Phase de congélation
Les paillettes sont placées dans un congélateur conditionné pour les congeler de 5 à -
35°C (Tselutin et al., 1999).
5.2.4 Stockage du sperme congelé
Après avoir été congelées, les paillettes sont rapidement organisées en lots
expérimentaux dans des tubes d'hémolyse refroidis au contact de la neige carbonique. Ces tubes
sont ensuite placés dans un bidon et immédiatement immergés dans de l'azote liquide. De plus,
les pailles sont placées dans un autre bidon et déplacées vers un cylindre de stockage,
garantissant que le niveau d'azote liquide dans le cylindre reste constamment plein, avec des
remplissages réguliers tous les 15 jours (Legendre et Billard, 1980).
5.2.5 Décongélation de la semence
Pour initier la transformation du sperme en fragments solidifiés, le Bain-marie est utilisé.
Néanmoins, les chercheurs ont constaté des variations dans la température optimale et la durée
de décongélation. Par conséquent, la décongélation du sperme dans des paillettes à une
température de 37°C pendant une période allant de 12 à 30 secondes donne une motilité
supérieure par rapport à une décongélation à 5°C pendant 2 minutes, dans le même ordre. De
plus, une décongélation à une température de 70°C pendant 7 secondes produit des résultats
plus favorables en termes de motilité et d’intégrité de la membrane qu’une décongélation à
37°C pendant 2 minutes ou à 40°C pendant 20 secondes (Tuli et al., 1991).
5.3 Utilisation des dilueurs
Lors de la conservation des spermatozoïdes (SPZ) par réfrigération ou congélation, il est
essentiel de les diluer à l'aide de diluants de haute qualité (England, 1993). En effet, les dilueurs
jouent un rôle important en protégeant le SPZ des effets néfastes de la réduction de la
température, tout en facilitant également l'atteinte d'une concentration finale prédéterminée de
spermatozoïdes (Peña et al., 2000 ; Stănescu et Alin, 2010).
1. Milieux de dilutions et leurs caractères
Exemples des milieux de dilution (Tableau 2, 3) :
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