Chapitre I : Généralités
17
5. Conservation de sperme
5.1 Conservation à court terme (Réfrigération)
La conservation de la laitance pendant une courte durée est un processus simple qui
consiste à la conserver au frais, soit sur de la glace, soit au réfrigérateur dans une plage de
température comprise entre 0 et 10 °C (Harvey et Hoar, 1980). Les spermatozoïdes ont la
capacité de supporter de brèves périodes de refroidissement, atteignant même des températures
de quelques degrés en dessous de zéro. Les recherches suggèrent que la température optimale
pour maintenir la qualité des spermatozoïdes se situe entre 3 et 5°C au-dessus de 0°C (François,
1946), car cela garantit leur motilité et leur viabilité après stockage à 4°C (Billard et al., 1977).
Contrairement à la méthode de congélation, cette approche offre un double avantage de
commodité et de prix abordable, car elle est facilement accessible et réalisable sans nécessiter
de procédures complexes. Cependant, un inconvénient de cette technique est sa capacité limitée
à conserver les graines pendant des périodes courtes à moyennes, contrairement à la
congélation, qui permet une conservation indéfinie (Levillan, 2005).
Les étapes de la réfrigération, telles que décrites par Sanchez et Billard (1977) et
développées par Paméla et Virginie (2008), peuvent être résumées comme suit :
Le sperme collecté est acheminé dans une chambre froide à une température de +2°C
afin d'équilibrer la température.
Une fois la température stabilisée, le sperme est dilué à l’aide de différents milieux
tamponnés. Par exemple, un pH de 9,0 et une concentration de cryoprotecteur de 5
% sont utilisés. Cela signifie que 2,5 ml de sperme sont mélangés à 0,25 ml de
cryoprotecteur.
Après avoir été laissé à une température de 2°C pendant une heure, le mélange est
ensuite transféré dans un réfrigérateur réglé à +4°C.
5.2 Conservation à long terme (congélation)
Selon les études menées par Legendre et Billard (1980) et Bakhach et al. (2007), il a été
constaté que des températures extrêmement basses, telles que celles obtenues par le stockage
dans l'azote liquide à (-196°C) ou dans la neige carbonique à (-79°C), immobilisent
efficacement toutes les réactions chimiques, les processus biologiques et interactions physiques
intra et extra-cellulaires.
17
5. Conservation de sperme
5.1 Conservation à court terme (Réfrigération)
La conservation de la laitance pendant une courte durée est un processus simple qui
consiste à la conserver au frais, soit sur de la glace, soit au réfrigérateur dans une plage de
température comprise entre 0 et 10 °C (Harvey et Hoar, 1980). Les spermatozoïdes ont la
capacité de supporter de brèves périodes de refroidissement, atteignant même des températures
de quelques degrés en dessous de zéro. Les recherches suggèrent que la température optimale
pour maintenir la qualité des spermatozoïdes se situe entre 3 et 5°C au-dessus de 0°C (François,
1946), car cela garantit leur motilité et leur viabilité après stockage à 4°C (Billard et al., 1977).
Contrairement à la méthode de congélation, cette approche offre un double avantage de
commodité et de prix abordable, car elle est facilement accessible et réalisable sans nécessiter
de procédures complexes. Cependant, un inconvénient de cette technique est sa capacité limitée
à conserver les graines pendant des périodes courtes à moyennes, contrairement à la
congélation, qui permet une conservation indéfinie (Levillan, 2005).
Les étapes de la réfrigération, telles que décrites par Sanchez et Billard (1977) et
développées par Paméla et Virginie (2008), peuvent être résumées comme suit :
Le sperme collecté est acheminé dans une chambre froide à une température de +2°C
afin d'équilibrer la température.
Une fois la température stabilisée, le sperme est dilué à l’aide de différents milieux
tamponnés. Par exemple, un pH de 9,0 et une concentration de cryoprotecteur de 5
% sont utilisés. Cela signifie que 2,5 ml de sperme sont mélangés à 0,25 ml de
cryoprotecteur.
Après avoir été laissé à une température de 2°C pendant une heure, le mélange est
ensuite transféré dans un réfrigérateur réglé à +4°C.
5.2 Conservation à long terme (congélation)
Selon les études menées par Legendre et Billard (1980) et Bakhach et al. (2007), il a été
constaté que des températures extrêmement basses, telles que celles obtenues par le stockage
dans l'azote liquide à (-196°C) ou dans la neige carbonique à (-79°C), immobilisent
efficacement toutes les réactions chimiques, les processus biologiques et interactions physiques
intra et extra-cellulaires.