Chapitre I : Généralités
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Hoar, 1980). Le processus d’activation est chargé de permettre la motilité d’un sperme. Une
fois activés, les spermatozoïdes peuvent bouger pendant environ 30 secondes. À l’époque
moderne, l’utilisation d’analyseurs d’images CASA (Computer Assisted Sperm Analysis)
permet une quantification plus précise de la nature et de la vitesse du mouvement des
spermatozoïdes (Rurangwa et al., 2004 ; Gennotte et al., 2012). L'évaluation de la qualité des
graines repose sur la motilité car elle englobe diverses caractéristiques cellulaires et séminales,
ce qui en fait la mesure la plus objective et la plus fiable (Gennotte et al., 2012, Shaliutina,
2013). Bien que la motilité ne garantisse pas la fertilité, les spermatozoïdes dépourvus de
motilité sont incapables de féconder (Billard et al., 1971).
4.2.3 Concentration
La concentration, qui indique la quantité de spermatozoïdes dans un millilitre de sperme,
peut être déterminée de différentes manières. Une méthode consiste à compter directement les
spermatozoïdes à l’aide d’un hémocytomètre. Alternativement, la spectrophotométrie, la
cytométrie en flux et la valeur du spermatocrite peuvent être utilisées pour mesurer
indirectement la concentration (Fauve et al., 2010). La spectrophotométrie et la cytométrie en
flux consistent à observer les changements de la densité optique d'une suspension de
spermatozoïdes à des longueurs d'onde spécifiques, tandis que la méthode de la valeur du
spermatocrite détermine la densité des spermatozoïdes après centrifugation (Billard et al., 1971
; Fauve et al., 2010). Chacune de ces techniques a ses limites (Fauve et al., 2010). Cependant,
la méthode la plus basique et la plus fiable pour déterminer la concentration consiste à compter
les spermatozoïdes à l’aide d’un hémocytomètre (Fauve et al., 2010). Pour déterminer la
concentration de spermatozoïdes, une formule de calcul est appliquée après avoir compté le
nombre de spermatozoïdes dans une zone quadrillée de l'hémocytomètre. Cette méthode
nécessite de diluer les spermatozoïdes dans une solution qui fixe et répartit les spermatozoïdes
sur toute la zone de comptage. Les solutions recommandées à cet effet sont une solution
physiologique de formol à 4 % ou une solution d'eau physiologique de NaCl à 8‰ (Billard et
al., 1971). Le taux de dilution spécifique peut varier en fonction des cellules
hémocytométriques et des préférences des auteurs. Cependant, un taux de dilution couramment
utilisé est de 1/2000 (Billard et al., 1971 ; Legendre et Billard, 1980 ; Gennotte et al., 2012).
Exemple d’hématimètre : la cellule de Thoma
La cellule de Thoma se compose d'une lame de verre robuste présentant un réseau
perpendiculaire de lignes gravées dans sa partie supérieure (Figure 5). Ce réseau divise la lame
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Hoar, 1980). Le processus d’activation est chargé de permettre la motilité d’un sperme. Une
fois activés, les spermatozoïdes peuvent bouger pendant environ 30 secondes. À l’époque
moderne, l’utilisation d’analyseurs d’images CASA (Computer Assisted Sperm Analysis)
permet une quantification plus précise de la nature et de la vitesse du mouvement des
spermatozoïdes (Rurangwa et al., 2004 ; Gennotte et al., 2012). L'évaluation de la qualité des
graines repose sur la motilité car elle englobe diverses caractéristiques cellulaires et séminales,
ce qui en fait la mesure la plus objective et la plus fiable (Gennotte et al., 2012, Shaliutina,
2013). Bien que la motilité ne garantisse pas la fertilité, les spermatozoïdes dépourvus de
motilité sont incapables de féconder (Billard et al., 1971).
4.2.3 Concentration
La concentration, qui indique la quantité de spermatozoïdes dans un millilitre de sperme,
peut être déterminée de différentes manières. Une méthode consiste à compter directement les
spermatozoïdes à l’aide d’un hémocytomètre. Alternativement, la spectrophotométrie, la
cytométrie en flux et la valeur du spermatocrite peuvent être utilisées pour mesurer
indirectement la concentration (Fauve et al., 2010). La spectrophotométrie et la cytométrie en
flux consistent à observer les changements de la densité optique d'une suspension de
spermatozoïdes à des longueurs d'onde spécifiques, tandis que la méthode de la valeur du
spermatocrite détermine la densité des spermatozoïdes après centrifugation (Billard et al., 1971
; Fauve et al., 2010). Chacune de ces techniques a ses limites (Fauve et al., 2010). Cependant,
la méthode la plus basique et la plus fiable pour déterminer la concentration consiste à compter
les spermatozoïdes à l’aide d’un hémocytomètre (Fauve et al., 2010). Pour déterminer la
concentration de spermatozoïdes, une formule de calcul est appliquée après avoir compté le
nombre de spermatozoïdes dans une zone quadrillée de l'hémocytomètre. Cette méthode
nécessite de diluer les spermatozoïdes dans une solution qui fixe et répartit les spermatozoïdes
sur toute la zone de comptage. Les solutions recommandées à cet effet sont une solution
physiologique de formol à 4 % ou une solution d'eau physiologique de NaCl à 8‰ (Billard et
al., 1971). Le taux de dilution spécifique peut varier en fonction des cellules
hémocytométriques et des préférences des auteurs. Cependant, un taux de dilution couramment
utilisé est de 1/2000 (Billard et al., 1971 ; Legendre et Billard, 1980 ; Gennotte et al., 2012).
Exemple d’hématimètre : la cellule de Thoma
La cellule de Thoma se compose d'une lame de verre robuste présentant un réseau
perpendiculaire de lignes gravées dans sa partie supérieure (Figure 5). Ce réseau divise la lame