MATERIELS ET METHODES
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• Ouvrir l’eau pour le réfrigérant ; le débit sera à surveiller pendant l’extraction.
• Après l’extraction, la matière grasse s'accumule dans le ballon.
• Mettre le ballon sur Rota-vapeur pour séparer le solvant et l’extrait et permet de
récupération de solvant.
• Mettre le ballon qui contient la matière grasse dans l’étuve à 105°C jusqu’à séchage,
puis laisser refroidir dans le dessiccateur.
• Peser le ballon à l’aide une balance de précision.
La matière grasse (MG) de l’échantillon est calculée par l’expression suivante :
MG%=(B-A)/C*100/MS*100
Avec : A : Poids su ballon Soxhlet sec, en grammes.
B : Poids du ballon + résidu après dessiccation, en grammes.
C : Prise d’essai, en grammes.
MS : résultat exprimé en % de matière sèche.
2.6.Dosage du glycogène par la méthode de cellulose brute (méthode de Weende)
a) Principe de la méthode
Méthode basée sur une double hydrolyse acide et alcaline. Hydrolyse acide à chaud avec
H2SO4 suivie d'une hydrolyse basique ou alcaline avec le NaOH à chaud.
L'échantillon est soumis à un traitement avec une solution d'acide sulfurique de 1,25 %, suivie
d'une solution d'hydroxyde de sodium de 1,25 %. Les solutions sont ajoutées à proximité du
point d'ébullition, chaque traitement dure environ 30 minutes. Chaque fois, le résidu est lavé à
l'eau chaude et séché pendant 24h à 105°C dans une étuve. A la fin, il est calciné pendant 3h à
une température de 530°C (Silvia, 2008).
b) Protocole ou mode opératoire (Silvia, 2008)
• Peser 1g d’échantillons à l’aide de balance de précision, puis mettre dans les matras à
distiller.
• Ajouter 100ml d’acide sulfurique (12,5g/l) dans chaque matras (c’est hydrolyse acide).
• Placer les matras à distiller dans digesteur de cellulose pendant 30min, allumer la
résistance électrique à une température élevée jusqu’à ce que ça commence à bouillir
puis diminuer la température.
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• Ouvrir l’eau pour le réfrigérant ; le débit sera à surveiller pendant l’extraction.
• Après l’extraction, la matière grasse s'accumule dans le ballon.
• Mettre le ballon sur Rota-vapeur pour séparer le solvant et l’extrait et permet de
récupération de solvant.
• Mettre le ballon qui contient la matière grasse dans l’étuve à 105°C jusqu’à séchage,
puis laisser refroidir dans le dessiccateur.
• Peser le ballon à l’aide une balance de précision.
La matière grasse (MG) de l’échantillon est calculée par l’expression suivante :
MG%=(B-A)/C*100/MS*100
Avec : A : Poids su ballon Soxhlet sec, en grammes.
B : Poids du ballon + résidu après dessiccation, en grammes.
C : Prise d’essai, en grammes.
MS : résultat exprimé en % de matière sèche.
2.6.Dosage du glycogène par la méthode de cellulose brute (méthode de Weende)
a) Principe de la méthode
Méthode basée sur une double hydrolyse acide et alcaline. Hydrolyse acide à chaud avec
H2SO4 suivie d'une hydrolyse basique ou alcaline avec le NaOH à chaud.
L'échantillon est soumis à un traitement avec une solution d'acide sulfurique de 1,25 %, suivie
d'une solution d'hydroxyde de sodium de 1,25 %. Les solutions sont ajoutées à proximité du
point d'ébullition, chaque traitement dure environ 30 minutes. Chaque fois, le résidu est lavé à
l'eau chaude et séché pendant 24h à 105°C dans une étuve. A la fin, il est calciné pendant 3h à
une température de 530°C (Silvia, 2008).
b) Protocole ou mode opératoire (Silvia, 2008)
• Peser 1g d’échantillons à l’aide de balance de précision, puis mettre dans les matras à
distiller.
• Ajouter 100ml d’acide sulfurique (12,5g/l) dans chaque matras (c’est hydrolyse acide).
• Placer les matras à distiller dans digesteur de cellulose pendant 30min, allumer la
résistance électrique à une température élevée jusqu’à ce que ça commence à bouillir
puis diminuer la température.