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II.2. Croissance des souches de microalgues sur milieu de référence
En premier temps, nous avons suivi la cinétique de croissance des souches de microalgues
sélection, à savoir la souche 2 ST, 4 CNR, 5 CNR, 10 ST et D ST sur milieu de culture favorable
à la culture des microalgues qui est le milieu BG11 (sa composition est en annexe n°1). Les
étapes de suivi consistent en :
- Préculture des souches : la préculture est une étape importante qui permet de fournir un
inoculum en pleine croissance (à partir de la phase exponentielle). Pour cela, 100 ml de
milieu BG11 stérile est préparé dans des erlenmeyers de 250 ml de capacité que l’on
ajout un fragment de colonies de la microalgue dans les conditions d’asepsie (devant un
bec bunsen). Les erlenmeyers contenant les microalgues sont par la suite incubées à une
température de 27 °C, une luminosité continue et un flux d’air stérile (fourni à l’aide
des aérateurs et passe sur des filtres seringues de porosité de 0,45 µm) pendant d’environ
une semaine (Figure 2).
- Inoculation du milieu BG11 par les suspensions des microalgues : un inoculum de
chaque suspension des microalgues en phase exponentielle de croissance est ajouté à
300 ml de BG11 stérile (préparé dans des erlenmeyers de 500 ml) de telle sorte à obtenir
une densité microalgale des milieux BG11 neufs, exprimée en densité optique à 680 nm
(DO à 680 nm), entre 0,15 à 0,35. Les cultures des microalgues sont incubées dans les
même conditions précédente pendant 14 jours.