Matériel et méthodes
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sucres. La gélose TSI est un milieu de culture contenant du lactose, du saccharose et du glucose,
ainsi qu'un indicateur de pH. Lorsque les bactéries fermentent ces sucres, elles produisent des
acides organiques qui abaissent le pH du milieu, entraînant un changement de couleur de
l'indicateur. Cette réaction peut être observée sous forme de changements de couleur dans le
milieu, permettant ainsi de différencier les bactéries fermentatives de celles non fermentatives.
Culot jaune et pente rouge : La bactérie utilise uniquement le glucose.
Culot et pente jaunes : La bactérie utilise le glucose, le lactose et/ou le saccharose.
Aucun changement de couleur : La bactérie n'utilise aucun des sucres et consomme les
peptones. (Ben Abdelkader M. 2003).
Mode opératoire
Mesurer avec précision 7 ml de gélose TSI dans chaque tube.
Inclinez les tubes pour obtenir une pente régulière sur toute la surface du milieu.
À l'aide d'une pipette pasteur, prélevez 2 à 3 colonies bactériennes dans chaque boite de
pétrie.
Inoculez les colonies en effectuant une piqûre centrale à l’intérieure de chaque tube.
Placez les tubes inoculés à 37°C.
Laissez les tubes incuber pendant 24 heures pour permettre la croissance bactérienne et
la fermentation des sucres.
Après l'incubation, observez visuellement les changements de couleur dans le milieu.
Test de fermentation du sorbitol
L'utilisation du test de fermentation du sorbitol par les entérocoques sur gélose MEVAG permet
de déterminer la voie métabolique préférée des entérocoques lorsqu'ils utilisent le sorbitol
comme source de carbone. La gélose MEVAG a été spécialement conçue pour faire la
distinction entre les entérocoques en leur permettant de fermenter le sorbitol à travers deux
voies métaboliques : la voie des phosphoketolases (PK) et la voie de la métabolisation du
glucose (MG). Il est crucial de faire cette distinction afin de caractériser les entérocoques et de
les identifier en microbiologie. (A. Bouvet et G. C o w r y 1994).
Mode opératoire
Mesurer avec précision 7 ml de gélose MEVAG dans chaque tube stérile.
Ajouter 7 gouttes de solution de sorbitol à 30 % dans chaque tube.
Bien mélanger les tubes pour homogénéiser la solution.
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sucres. La gélose TSI est un milieu de culture contenant du lactose, du saccharose et du glucose,
ainsi qu'un indicateur de pH. Lorsque les bactéries fermentent ces sucres, elles produisent des
acides organiques qui abaissent le pH du milieu, entraînant un changement de couleur de
l'indicateur. Cette réaction peut être observée sous forme de changements de couleur dans le
milieu, permettant ainsi de différencier les bactéries fermentatives de celles non fermentatives.
Culot jaune et pente rouge : La bactérie utilise uniquement le glucose.
Culot et pente jaunes : La bactérie utilise le glucose, le lactose et/ou le saccharose.
Aucun changement de couleur : La bactérie n'utilise aucun des sucres et consomme les
peptones. (Ben Abdelkader M. 2003).
Mode opératoire
Mesurer avec précision 7 ml de gélose TSI dans chaque tube.
Inclinez les tubes pour obtenir une pente régulière sur toute la surface du milieu.
À l'aide d'une pipette pasteur, prélevez 2 à 3 colonies bactériennes dans chaque boite de
pétrie.
Inoculez les colonies en effectuant une piqûre centrale à l’intérieure de chaque tube.
Placez les tubes inoculés à 37°C.
Laissez les tubes incuber pendant 24 heures pour permettre la croissance bactérienne et
la fermentation des sucres.
Après l'incubation, observez visuellement les changements de couleur dans le milieu.
Test de fermentation du sorbitol
L'utilisation du test de fermentation du sorbitol par les entérocoques sur gélose MEVAG permet
de déterminer la voie métabolique préférée des entérocoques lorsqu'ils utilisent le sorbitol
comme source de carbone. La gélose MEVAG a été spécialement conçue pour faire la
distinction entre les entérocoques en leur permettant de fermenter le sorbitol à travers deux
voies métaboliques : la voie des phosphoketolases (PK) et la voie de la métabolisation du
glucose (MG). Il est crucial de faire cette distinction afin de caractériser les entérocoques et de
les identifier en microbiologie. (A. Bouvet et G. C o w r y 1994).
Mode opératoire
Mesurer avec précision 7 ml de gélose MEVAG dans chaque tube stérile.
Ajouter 7 gouttes de solution de sorbitol à 30 % dans chaque tube.
Bien mélanger les tubes pour homogénéiser la solution.