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gram négatif. Les profils biochimiques ou numériques sont interprétés à l’aide de
tableaux, de catalogues analytiques ou de logiciels (Touaitia 2024).
Le mode opératoire a été suivi selon ces étapes :
- Préparation de l’inoculum : dans la zone stérile, une suspension bactérienne
est préparée en ensemençant l’eau distillée d’un tube stérile avec une colonie
bactérienne issue d’une culture pure prélevée stérilement avec une pipette
Pasteur.
- Préparation de la galerie: une atmosphère humide est créé en réunissant le
fond et le couvercle d’une boîte d’incubation et en répartissant de l’eau dans les
alvéoles.
- Inoculation de la galerie : l’ensemencement de tous les tubules du type ADH et
les cupules des tests sont ensemencées avec une pipette Pasteur stérile. Les
cupules sont remplies avec de l’huile de paraffine, pour créer l’anaérobiose.
- Incubation : la plaque est prête pour incubation à 35- 37 °C (API 20 E) pendant
18-24 heures (Fig. 14).
Figure 14: Aspect de la galerie API 20 E après l’inoculation
La lecture des résultats se fait par lecture directe pour les réactions spontanées, et
indirecte en ajoutant les réactifs nécessaires aux puits correspondants pour détecter les
produits métaboliques particuliers. En effet, le réactif TDA est ajouté dans la cupule TDA,
le réactif de Kovacs dans la cupule IND et le réactif VP1 puis VP 2 dans la cupule VP. En
attendant 10minutes, la lecture du résultat des réactions (positives ou négatives) se fait
en fonction des variations de couleurs.
L'interprétation des résultats est réalisée à l’aide d’un classeur Excel qui permet
l’identification d’une souche microbienne à partir de son profil obtenu
automatiquement. Par conséquent l'identification précise des espèces et la
gram négatif. Les profils biochimiques ou numériques sont interprétés à l’aide de
tableaux, de catalogues analytiques ou de logiciels (Touaitia 2024).
Le mode opératoire a été suivi selon ces étapes :
- Préparation de l’inoculum : dans la zone stérile, une suspension bactérienne
est préparée en ensemençant l’eau distillée d’un tube stérile avec une colonie
bactérienne issue d’une culture pure prélevée stérilement avec une pipette
Pasteur.
- Préparation de la galerie: une atmosphère humide est créé en réunissant le
fond et le couvercle d’une boîte d’incubation et en répartissant de l’eau dans les
alvéoles.
- Inoculation de la galerie : l’ensemencement de tous les tubules du type ADH et
les cupules des tests sont ensemencées avec une pipette Pasteur stérile. Les
cupules sont remplies avec de l’huile de paraffine, pour créer l’anaérobiose.
- Incubation : la plaque est prête pour incubation à 35- 37 °C (API 20 E) pendant
18-24 heures (Fig. 14).
Figure 14: Aspect de la galerie API 20 E après l’inoculation
La lecture des résultats se fait par lecture directe pour les réactions spontanées, et
indirecte en ajoutant les réactifs nécessaires aux puits correspondants pour détecter les
produits métaboliques particuliers. En effet, le réactif TDA est ajouté dans la cupule TDA,
le réactif de Kovacs dans la cupule IND et le réactif VP1 puis VP 2 dans la cupule VP. En
attendant 10minutes, la lecture du résultat des réactions (positives ou négatives) se fait
en fonction des variations de couleurs.
L'interprétation des résultats est réalisée à l’aide d’un classeur Excel qui permet
l’identification d’une souche microbienne à partir de son profil obtenu
automatiquement. Par conséquent l'identification précise des espèces et la