Chapitre 3
57
Des isolements de ces colonies suspectes sont réalisés sur le milieu SS afin de favoriser la
prolifération des colonies suspectes. Ensuite, une batterie de tests est effectuée pour confirmer
la présence de salmonelles :
Figure 26: Série de tests réalisés sur souche suspecte : a) coloration de gram, b) test catalase, c) test oxydase, d) test
triple sugar iron, e) milieu urée indole
● La coloration de Gram est réalisée pour déterminer la forme et la coloration des bactéries
à l'aide d'une série de colorants appliqués sur un frottis bactérien, comprenant
notamment l'application de violet de gentiane, de lugol, d'alcool et de fuchsine.
● Un test de catalase est effectué sur une quantité de bactéries afin d'évaluer leur capacité
à dégrader le peroxyde d'hydrogène. La formation de bulles indique un résultat positif.
● Un test d'oxydase est requis pour détecter la présence de l'enzyme cytochrome oxydase
chez les bactéries Gram négatif, en observant une coloration après dépôt de la charge
bactérienne sur des disques oxydase.
● Un test TSI (Triple Sugar Iron) est préparé pour l'identification présumée des
entérobactéries, basée sur leur capacité à fermenter le glucose, le lactose et le
saccharose, ainsi que sur la production de gaz et d'H2S. Les bactéries sont inoculées
dans des tubes contenant le milieu TSI et incubées à 37 °C pendant 24 heures.
● Le milieu Urée Indole est préparé après le test TSI pour mettre en évidence la présence
d'uréase, de tryptophane désaminase et de production d'indole. Les bactéries sont
incubées dans ce milieu à 37 °C pendant 24 heures, et une coloration rose indique un
résultat positif.
a
b
c
d
e
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Des isolements de ces colonies suspectes sont réalisés sur le milieu SS afin de favoriser la
prolifération des colonies suspectes. Ensuite, une batterie de tests est effectuée pour confirmer
la présence de salmonelles :
Figure 26: Série de tests réalisés sur souche suspecte : a) coloration de gram, b) test catalase, c) test oxydase, d) test
triple sugar iron, e) milieu urée indole
● La coloration de Gram est réalisée pour déterminer la forme et la coloration des bactéries
à l'aide d'une série de colorants appliqués sur un frottis bactérien, comprenant
notamment l'application de violet de gentiane, de lugol, d'alcool et de fuchsine.
● Un test de catalase est effectué sur une quantité de bactéries afin d'évaluer leur capacité
à dégrader le peroxyde d'hydrogène. La formation de bulles indique un résultat positif.
● Un test d'oxydase est requis pour détecter la présence de l'enzyme cytochrome oxydase
chez les bactéries Gram négatif, en observant une coloration après dépôt de la charge
bactérienne sur des disques oxydase.
● Un test TSI (Triple Sugar Iron) est préparé pour l'identification présumée des
entérobactéries, basée sur leur capacité à fermenter le glucose, le lactose et le
saccharose, ainsi que sur la production de gaz et d'H2S. Les bactéries sont inoculées
dans des tubes contenant le milieu TSI et incubées à 37 °C pendant 24 heures.
● Le milieu Urée Indole est préparé après le test TSI pour mettre en évidence la présence
d'uréase, de tryptophane désaminase et de production d'indole. Les bactéries sont
incubées dans ce milieu à 37 °C pendant 24 heures, et une coloration rose indique un
résultat positif.
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