MATERIELS ET METHODES
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5.1.3. Dénombrement des levures et moisissures
Des boîtes de Pétri préparées en utilisant un milieu gélosé sélectif sont inoculées, par un
ensemencement en surface.
 Mode opératoire
Des aliquotes de 0.1 ml de et de chaque dilution ont été ensemencées en surface, sur la
gélose Sabouraud au Gentamycine initialement coulée et solidifiée dans les boîtes de Pétri.
 Lecture
Le dénombrement des colonies blanches ou colorées, lisses et crémeuses de levures et des
moisissures sous forme poudreuse, qui pourront être aperçu après 5 jours d’incubation à 25 °C,
sera effectué sous les mêmes conditions citées auparavant (DEGNON et al., 2013).
5.1.4. Recherche et dénombrement des coliformes fécaux
Les coliformes se présentent sous forme de bacilles à Gram négatif, non sporogènes,
oxydase négative, aéro-anaérobie facultatifs, capables de croître en présence de sels biliaires,
et capables de fermenter le lactose avec production d'acide et de gaz, à 37 °C.
Dans notre travail, la recherche et le dénombrement des coliformes fécaux ont été effectués
selon deux méthode :
 En milieux liquides ; méthode du Nombre le Plus Probable (NPP)
 Sur milieu solide ; ensemencement en surface sur milieu gélosé sélectif (gélose lactosée
au TTC et au Tergitol 7).
5.1.4.1. Recherche et dénombrement des coliformes fécaux, en milieu liquide
 Mode opératoire
1 ml de chaque dilution, préalablement préparée, a été introduit aseptiquement dans un tube
du milieu sélectif Bouillon Lactosé Bilié au Vert Brillant (BLBVB) simple concentration, avec
cloche de Durham, à raison de 3 tubes pour chaque dilution, puis, les tubes ensemencés ont été
incubés à 44 °C, pendant 24-48 h.
 Lecture