MATERIELS ET METHODES
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 Flore fongique (levures et moisissures)
 Coliformes fécaux (Escherichia coli)
 Staphylococcus aureus à coagulase positive
 Salmonelles
 Shigella
 Clostridium sulfito-réducteurs (ASR).

Les vibrions
5.1. Protocoles d’analyse
5.1.1. Préparation de la Solution mère et des dilutions décimales
La préparation de la solution mère consiste à incorporer 25 g du produit final à analyser,
qui a été aseptiquement pesé au préalable, à l’aide d’une balance de précision, dans 225 ml
d'Eau Peptonée Tamponnée (EPT). Après homogénéisation, cette solution mère 10
-1
sera
soumise à une série de dilution décimale.
A partir de la solution mère 10
-1
, les dilutions décimales successives ont été obtenues en
introduisant 1 ml de la solution la plus concentrées, à l’aide d’une pipette stérile, dans un tube
à essai contenant 9 ml d’eau physiologique stérile à 0.85 % NaCl, afin de garantir l’intégrité
des cellules microbiennes potentiellement présentes, et les protéger des chocs osmotiques.
L'opération a été poursuivie jusqu'à l’obtention de la dilution 10
-8
, et avant
ensemencement, chaque dilution a été bien homogénéisée à l’aide d’un vortex.
5.1.2. Dénombrement de la Flores Mésophile Aérobie Totale (FTAM)
Le dénombrement est réalisé selon les normes NF V 08- 011 N et NF V 08-51, par la
méthode d'ensemencement en surfusion sur gélose Plate Count Agar (PCA) sur Gélose
Nutritive (GN).
 Mode Opératoire
1 ml de chaque dilution est, stérilement, déposé dans des boîtes de Pétri à l'aide d’une
pipette graduée stérile de 1 ml, ensuite 15 ml du milieu GN en surfusion refroidi (à environ 45
°C), sont additionnés à chaque boîte de Pétri. L'inoculum est soigneusement homogénéisé avec
le milieu de culture par des mouvements circulaires de « va-et-vient » ou en forme de « 8 »,
puis laissé sur une surface fraîche et horizontale. Après solidification, les boîtes sont incubées