Chapitre II
Matériel et méthodes
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La chair est broyée à l’aide d’un mortier en ajoutant 225ml d’eau peptonée tamponnée (EPT).
Cette suspension constitue alors la solution mère (10
−1 ). Des dilutions décimales de 10
−2
,10
−3 , 10
−4 ont été préparées par la suite.
II.3.2. Isolement et dénombrement
II.3.2.1. Dénombrement de la flore aérobie à 30°C
1 ml de chaque dilution (10
-1 , 10
-2 , 10
-3 , 10
-4 ), est prélevé et introduit aseptiquement dans des
boites de Pétri à usage unique (ISO 4833, 2013). Puis, 15 ml de PCA (Plate Count Agar)
fondu et refroidi au bain marie à 45°C, est ajouté.
Le mélange est homogénéisé par des mouvements horizontaux et circulaires des boites
(mouvement de 8). Après solidification, les boites sont ensuite incubées à 30°C.
Le comptage a été fait après 72 heures d’incubation. Les colonies caractéristiques
apparaissent blanchâtres de de forme lenticulaire.
Le résultat est exprimé comme suit :
𝑵 =
∑ 𝒄𝒐𝒍𝒐𝒏𝒊𝒆𝒔
𝑽×(𝒏𝟏+𝟎,𝟏 𝒏𝟐)×𝒅𝟏
………(1)
Avec :
Figure 11 : Prélèvement du 25g de la chaire
pour les analyses