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La PCR ou réaction de polymérisation en chaîne est une technique de
biologie moléculaire d'amplification génique in vitro, qui permet de multiplier en grand nombre (facteur de l'ordre du milliard), une séquence
d' ADN ou d' ARN connue, à partir d'une faible quantité (quelques molécules) d'acide nucléique et d'amorces complémentaires (une vingtaine de
nucléotides) spécifiques de la zone à amplifier.
On peut ainsi détecter la présence du VIH ou du VHB, VHC .. . dans un
échantillon de sang très peu concentré. Cette technique utilise une enzyme thermostable: la Taq polymérase (ou une enzyme proche).
Fragment d 'ADN initial
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+
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1 Q) Denaturation de l'ADN (chauffage 10 à 15 min à 95°C)
. .
3'
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>
Deux brins d'ADN complémentaires
1 , 3·
5'
séparés par la chaleur
~@ 10 à 60 s à 56-64°C
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® Élongation
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CD Denaturation
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Hybridation par
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' les amorces d ' ADN
A .3' Synthèse des brins d'ADN complémentaires
t ~ grâce à la Taq polymérase
+
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--+ Sens de la synthèse d'ADN
Taq polymérase (ADN
polymérase thermorésistante)
Amorce d'ADN
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fragments d ADN
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identiques
t CD.®&® t
entre eux
Nombreuses copies identiques du même fragment d'ADN
Principe de la réaction de polymérisation en chaine
37
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biologie moléculaire d'amplification génique in vitro, qui permet de multiplier en grand nombre (facteur de l'ordre du milliard), une séquence
d' ADN ou d' ARN connue, à partir d'une faible quantité (quelques molécules) d'acide nucléique et d'amorces complémentaires (une vingtaine de
nucléotides) spécifiques de la zone à amplifier.
On peut ainsi détecter la présence du VIH ou du VHB, VHC .. . dans un
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