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Les isotopes sont employés en biochimie pour marquer des molécules,
suivre des réactions ... On cherche souvent à localiser la présence de ces
molécules marquées à un endroit précis : sur un gel d'électrophorèse,
dans un tissu ou une cellule ... L'autoradiographie est une méthode permettant la détection qualitative de matériel radioactif fixé sur un substrat solide : gel de polyacrylamide, nitrocellulose, plaque de chromatographie sur couche mince ... Cette matrice peut alors être mise en contact
avec un film (généralement à rayons X). Les radiations émises (particules
ou rayons ) impressionneront alors le film vis-à-vis leur lieu d'émission.
Le développement du film permet de localiser les endroits où est situé
le traceur radioactif. En microscopie, les films traditionnels sont moins
facilement utilisables : on emploie alors des émulsions photographiques
qu'on dépose directement sur des coupes histologiques.
• Tranche mince de tissu
(0,5 mm d'épaisseur) ~
Acide aminé
PULSE
marqué au
14
C
-
Incorporation de
acide aminé m arqué
(quelques min)
Coulage de
l'émulsion
p hotogra phique
r -vzv2zz2277/1 •
•
Vue de profil
~.:" + ~ , ,,
de la grille
........... __._.._,_..~
VZZZ72772'2?t Rayonnement f3
Coupe de tissu
(50 nm d'épaisseur)
~
.... .
Transfert dans
un milieu
non radio actif
Acide aminé
non marqué
Arrêt de l'incorporation
de l'acide aminé dans
le t issu
Étalement du tissu sur
une grille après f ixation
osmotique (cellules tuées),
inclusion dans une résine
et réalisation d e coupes
Autoradiographie d'un tissu après marquage
par un acide aminé radioactif