Détermination des séquences par les méthodes spectroscopiques
151
[M+H]
+
= 2241
O=C-(CH2),&H3
Figure 9.6 Représentation schématique de la fragmentation d’un ganglioside perméthylé
de granulocytes. Extrait de M. N. Fukuda, A. Dell, J. E. Oates, P. Wu, J. C. Klock et
M. Fukuda; J. B i d Chern., 260 (1985) 967-982 (publié avec l’aimable autorisation
d’ Academic Press).
La tendance au clivage au niveau des résidus HexNAc est particulièrement
intéressante dans l’examen des glycolipides. I1 y a dans ces composés une chaîne
principale formée de résidus P-D-Gal-( 1 + 4)-P-D-GlcNAc, correspondant au
disacharide N-acétyllactosamine. Ces résidus disaccharidiques sont reliés par des
liaisons (1+ 3) de façon schématisée en 9.9. L‘hexasaccharide (n = 3), qui est non
ramifié, donne des fragments à 3,2 et 1 unités HexHexNAc. En revanche, l’hexasaccharide ramifié 9.10 perméthylé ne donne pas de fragment tétrasaccharidique
(il faut se rappeler que la charge reste du côté non réducteur).
La spectroscopie f.a.b. ne permet en général pas de déterminer la position des
liaisons. Cependant on peut parfois reconnaître la présence d’un fucose en 3 du
résidu P-D-GlcNAc. Lorsque l’ion de rupture principale a une masse inférieure à
900, on peut observer une fragmentation ultérieure, selon l’équation (9.4). Si
OH(3) n’était pas substitué dans l’oligosaccharide, la perte de masse correspondrait à CH,OH, 32. S’il y avait un fucose, la perte de masse serait 206.
(9.4)
RO
- RO
_____
NMeAc
OR’ NMeAc
9.4.2 Technique d’injection dite << électrovaporisation D
Certains modèles récents de spectromètres de masse permettent d’employer
une technique d’injection considérablement plus simple. Une solution de l’échantillon est injectée directement dans l’appareil au moyen d’une seringue. On observe des pics moléculaires parfaitement détachés. Nous donnerons ici l’exemple du
spectre du pentasaccharide sulfaté, sel de sodium, 9.11. Nous aurons l’occasion de
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[M+H]
+
= 2241
O=C-(CH2),&H3
Figure 9.6 Représentation schématique de la fragmentation d’un ganglioside perméthylé
de granulocytes. Extrait de M. N. Fukuda, A. Dell, J. E. Oates, P. Wu, J. C. Klock et
M. Fukuda; J. B i d Chern., 260 (1985) 967-982 (publié avec l’aimable autorisation
d’ Academic Press).
La tendance au clivage au niveau des résidus HexNAc est particulièrement
intéressante dans l’examen des glycolipides. I1 y a dans ces composés une chaîne
principale formée de résidus P-D-Gal-( 1 + 4)-P-D-GlcNAc, correspondant au
disacharide N-acétyllactosamine. Ces résidus disaccharidiques sont reliés par des
liaisons (1+ 3) de façon schématisée en 9.9. L‘hexasaccharide (n = 3), qui est non
ramifié, donne des fragments à 3,2 et 1 unités HexHexNAc. En revanche, l’hexasaccharide ramifié 9.10 perméthylé ne donne pas de fragment tétrasaccharidique
(il faut se rappeler que la charge reste du côté non réducteur).
La spectroscopie f.a.b. ne permet en général pas de déterminer la position des
liaisons. Cependant on peut parfois reconnaître la présence d’un fucose en 3 du
résidu P-D-GlcNAc. Lorsque l’ion de rupture principale a une masse inférieure à
900, on peut observer une fragmentation ultérieure, selon l’équation (9.4). Si
OH(3) n’était pas substitué dans l’oligosaccharide, la perte de masse correspondrait à CH,OH, 32. S’il y avait un fucose, la perte de masse serait 206.
(9.4)
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NMeAc
OR’ NMeAc
9.4.2 Technique d’injection dite << électrovaporisation D
Certains modèles récents de spectromètres de masse permettent d’employer
une technique d’injection considérablement plus simple. Une solution de l’échantillon est injectée directement dans l’appareil au moyen d’une seringue. On observe des pics moléculaires parfaitement détachés. Nous donnerons ici l’exemple du
spectre du pentasaccharide sulfaté, sel de sodium, 9.11. Nous aurons l’occasion de